减毒的革兰氏阴性细菌.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102864090A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102864090A(43)申请公布日2013.01.09(21)申请号201110431116.7(74)专利代理机构中国国际贸易促进委员会专(22)申请日2003.04.04利商标事务所11038代理人袁泉(30)优先权数据60/370,2822002.04.05US(51)Int.Cl.10/406,6862003.04.03USC12N1/20(2006.01)C12N1/21(2006.01)(62)分案原申请数据C12N15/31(2006.01)03812380.02003.04.04A61K39/102(2006.01)(83)生物保藏信息A61K39/02(2006.01)I-30012003.04.01A61P31/04(2006.01)I-30002003.04.01C12R1/01(2006.01)I-29992003.04.01I-30022003.04.01I-30032003.04.01(71)申请人梅瑞尔有限责任公司地址美国乔治亚(72)发明人H·R·科鲁克J·E·施R·G·费尔德曼S·G·科特布罗泽F-X·里格罗斯权利要求书权利要求书11页页说明书说明书4040页页序列表序列表8383页页(54)发明名称减毒的革兰氏阴性细菌(57)摘要本发明公开并要求保护革兰氏阴性细菌的突变体，其中所述细菌在核苷酸序列中具有至少一处突变，且由所述核苷酸序列编码的多肽与由选自下组的核苷酸序列编码的氨基酸序列具有等于或大于70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、或99％的同一性：SEQIDNO：2、6、9、12、16、19、22、25、28、31、34、37、40、43、46、49、52、55、58、61、64、67、70、75、78、81、84、87、90、和93所示核苷酸序列，所述突变导致细菌的毒力减弱。本发明还公开并要求保护包含这种突变体的免疫原性组合物和疫苗。CN1028649ACN102864090A权利要求书1/1页1.革兰氏阴性细菌突变体，其中所述细菌在核苷酸序列中具有突变，且所述核苷酸序列编码的多肽与由SEQIDNO：75的核苷酸序列编码的氨基酸序列具有等于或大于70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、或99％的同一性，所述突变导致细菌的毒力减弱，其中所述突变是在SEQIDNO：75的第1072-1087位核苷酸之间的插入。2.权利要求1的突变体，其中所述突变具有第二多肽，第二多肽具有由SEQIDNO：75所示核苷酸序列编码的氨基酸序列。3.权利要求1或2的突变体，其中细菌是巴斯德氏菌科。4.权利要求3的突变体，其中细菌选自：多杀巴斯德氏菌、溶血巴斯德氏菌、鸭瘟巴斯德氏菌和大叶性肺炎放线杆菌。5.权利要求4的突变体，其中细菌是多杀巴斯德氏菌。6.权利要求1-5中任一项的突变体，它包含异源核酸序列，所述异源核酸序列编码来自致病病毒性、寄生物性或细菌性因子的免疫原、治疗性蛋白质、变应原、生长因子或细胞因子。7.权利要求1-6中任一项的突变体，其具有SEQIDNO：75的核苷酸序列中的突变。8.权利要求1-7中任一项的突变体，其是可以以编号CNCMI-3001获得的突变体9G8。9.权利要求1-7中任一项的突变体，其中所述突变体具有2个或更多个突变。10.权利要求1-7中任一项的突变体，其具有突变的2个或更多个如下序列：SEQIDNO：2、6、9、12、16、19、22、25、28、31、34、37、40、43、46、49、52、55、58、61、64、67、70、75、78、81、84、87、90、或93。11.权利要求1-7中任一项的突变体，其具有突变的2个或更多个如下序列：SEQIDNO：37、40、75、90、93。12.权利要求1-7中任一项的突变体，其具有突变的2个或更多个如下序列：SEQIDNO：37和75；SEQIDNO：40和75；SEQIDNO：75和90；或SEQIDNO：75和93。13.包含权利要求1-12中任一项的减毒的突变体以及制药学可接受稀释剂、载体、介质、或赋形剂的疫苗。14.权利要求13的疫苗，还包含佐剂。15.包含依照权利要求1-12中任一项的减毒的突变体以及制药学可接受稀释剂、载体、介质、或赋形剂的的免疫原性组合物。16.权利要求15的免疫原性组合物，还包含佐剂。17.具有SEQIDNO：75所示序列并具有第1072-1087位核苷酸之间的插入的分离核酸分子。18.权利要求1-12中任一项的突变体在制备活的减毒免疫原性组合物或制备活的减毒疫苗组合物中的用途。19.权利要求1-12中任一项的突变体，