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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106350462A(43)申请公布日2017.01.25(21)申请号201610792853.2C12Q1/04(2006.01)(22)申请日2016.08.31C12G3/02(2006.01)C12R1/865(2006.01)(83)生物保藏信息CCTCCNO:M20150212015.01.08(71)申请人温州科技职业学院地址325000浙江省温州市瓯海区东方南路38号(72)发明人李彦坡徐静张阳李燕蒋巧俊林胜利(74)专利代理机构北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350代理人汤东凤(51)Int.Cl.C12N1/16(2006.01)C12N1/02(2006.01)权利要求书2页说明书6页(54)发明名称一种酿酒酵母菌株及酿酒酵母筛选方法及酵母菌株酿造杨梅酒的工艺(57)摘要本发明涉及一种微生物发酵领域,特别涉及一种酿酒酵母菌株及酿酒酵母筛选方法及酵母菌株酿造杨梅酒的工艺。本发明提供了如下技术方案:一种酿酒酵母菌株,该菌株是已成熟且自然由杨梅树上脱落至地面的杨梅发酵筛选出来的,该菌株已于2015年1月8日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNO:M2015021。采用上述技术方案,提供了一种专一性强、起酵速度快、发酵活力强、酒精耐受力高、有较强的抗SO2能力、不产生异味物质、酒精转化率高、风味独特的优良高适应性酿酒酵母菌株、酿酒酵母筛选方法及口感优良的酵母菌株酿造杨梅酒的工艺。CN106350462ACN106350462A权利要求书1/2页1.一种酿酒酵母菌株,其特征在于:该菌株是已成熟且自然由杨梅树上脱落至地面的杨梅发酵筛选出来的,该菌株已于2015年1月8日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNO:M2015021。2.一种酿酒酵母筛选方法,其特征在于:步骤如下:a、将已成熟且自然由杨梅树上脱落至地面的杨梅采用打浆设备进行打浆,使杨梅形成浆体;b、将步骤a的浆体进行过滤;c、将步骤b中的浆体放置于培养箱中使其发酵;d、选择步骤c中发酵形成具有酵母典型特征的菌落,并对其进行划线分离;e、将步骤d中完成划线分离的菌落进行镜检,初步筛选出一端或多端出芽的酵母菌株;f、将初步筛选出的酵母菌株接种于培养基中进行纯化;h、将步骤f中进行纯化的酵母菌株采用杜式管进行复筛;e、对步骤h中经过复筛的酵母菌株的发酵性能进行测试,并挑选出较为优质的酵母菌株。3.根据权利要求2所述的酿酒酵母筛选方法,其特征在于:将步骤c中的浆体装入杀菌的锥形瓶中,将其放入恒温20℃—25℃中的培养箱中培养3—5天。4.根据权利要求2或3所述的酿酒酵母筛选方法,其特征在于:将步骤c中发酵前、中、后期取发酵液进行梯度稀释平板涂布,每个梯度至少做3个平行,培养2—3天后,按照步骤d中的方式进行划线分离,并且划线分离经过3—4次得到纯化的酵母菌株。5.根据权利要求2或3所述的酿酒酵母筛选方法,其特征在于:步骤f中培养基为YPD液体培养基,其中,将步骤步骤d中的酵母菌株接种YPD液体培养基活化24h后接种到WL琼脂培养基28℃培养5d后观察,筛选出菌落颜色为奶油色或浅黄色至绿色,表面为球形突起光滑,不透明,奶油状的菌株并做斜面保存。6.根据权利要求2或3所述的酿酒酵母筛选方法,其特征在于:步骤e中对经过复筛的酵母菌株的发酵性能测试范围如下:酵母菌株的耐SO2测试、酵母菌株的耐乙醇测试、酵母菌株的耐酸测试及酵母菌株的发酵测试。7.一种采用权利要求1中酵母菌株酿造杨梅酒的工艺,其特征在于:首先取已成熟且自然由杨梅树上脱落至地面的杨梅,将果肉破碎,通过压滤机压榨成果汁;调整果汁成分;将权利要求1中的纯酵母菌株通过逐级扩大培养方式进行培养;将培养后的酵母株接种至调整成分后的果汁中进行,并进行发酵;最后将发酵完成后将发酵液泵入板框压滤机内过滤,过滤后的果酒置于陈酿罐内陈酿。8.根据权利要求7所述的酵母菌株酿造杨梅酒的工艺,其特征在于:所述的已成熟且自然由杨梅树上脱落至地面的杨梅置于冲浪清洗机中清洗干净,于榨汁机中分离果肉和核,将果肉进一步破碎,破碎后的果浆离心分离去除大颗粒果肉,再将分离的果汁通过板框压滤机进一步过滤后即得果汁;其中调整果汁成分步骤如下:添加白砂糖调整果汁含糖量,采用溶糖罐溶解白砂糖,使果汁最终含糖量为20%,将杨梅汁泵入发酵罐内待发酵。9.根据权利要求7或8所述的酵母菌株酿造杨梅酒的工艺,其特征在于:所述的纯酵母菌株逐级扩大培养方式:将权利要求1中的纯菌种通过逐级扩大培养方式,首先将保存的斜面菌株接种于500ml麦芽汁液体培养基中进行25℃恒温培养箱中培养48h制得一级扩大培2CN106350462A权利要求书2/2页养液,再以