叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用.docx

叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用每年的大学毕业生，免不了都要写论文，下面文书帮小编给大家带来一篇论文范文，欢迎阅读！【摘要】观察叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用。【方法】将NIH小鼠随机分成正常对照组，模型组，叶下珠复方Ⅱ号高、中、低剂量组(剂量分别为110、55、27.5g·kg-1)，联苯双酯组(150mg·kg-1);以刀豆蛋白A(ConA)和D?氨基半乳糖(D?GalN)分别复制小鼠急性肝损伤模型，用叶下珠复方II号水提液进行干预治疗，并与联苯双酯进行对照，检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性，并观察肝组织病理改变。【结果】叶下珠复方Ⅱ号可显著性降低两种实验性肝损伤小鼠血清ALT和AST活性，升高肝损伤小鼠肝组织SOD活性，与模型组比较差异有显著性意义(P0.05)，且可明显减轻肝组织病理改变。【结论】叶下珠复方Ⅱ号对刀豆蛋白A和D?氨基半乳糖所致小鼠实验性肝损伤具有较好的保护作用，作用机制与抑制脂质过氧化损伤有关。【关键词】叶下珠复方Ⅱ号/药理学肝损伤/中药疗法肝/病理学疾病模型动物小鼠叶下珠复方Ⅱ号是在叶下珠复方[1]的基础上加入桃仁、苦参等药物组方而成，具有解毒活血、疏肝健脾作用，临床上主要用于慢性乙型肝炎和肝纤维化的治疗。为探讨该复方对实验性肝损伤保护作用的效果，我们以NIH小鼠为实验对象，观察该方对刀豆蛋白A(ConA)所致免疫性肝损伤模型和D?氨基半乳糖(D?GalN)所致化学性肝损伤模型的作用，现报道如下。1材料与方法1.1动物NIH小鼠，雌雄各半，体质量18～22g，由广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号为SCXK(粤)2003-0001。1.2药物叶下珠复方Ⅱ号组方药材购于广州中医药大学第一附属医院，水煎2次，混合后浓缩成含生药4kg/L，用时以蒸馏水配成所需浓度;联苯双酯滴丸由北京协和制药厂生产，批号04060106，每丸含联苯双酯7.5mg，试验时以30g/L的二甲基亚砜溶解，再用蒸馏水稀释至所需浓度;刀豆蛋白A(ConA)为美国华盛顿生物药品公司产品;D?氨基半乳糖(D?GalN)由重庆医科大学生化教研室生产，批号050326。1.3主要试剂与仪器谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)检测试剂盒均由上海荣盛生物技术有限公司提供，批号为20050125;超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所，批号20041108;722型分光光度计(上海第三分析仪器厂);TLL?C台式冷冻离心机(北京四环科学仪器厂);CK40?F200型显微镜(OlympusOpticalCo.Ltd)。1.4ConA致小鼠急性肝损伤模型复制及分组、给药方法[2]将60只NIH小鼠随机分为6组，每组10只，分别为正常对照组，模型组，叶下珠复方Ⅱ号高、中、低剂量组(简称中药高、中、低剂量组，剂量分别为110、55、27.5g·kg-1，相当于20倍、10倍和5倍临床用药剂量)，联苯双酯(150mg·kg-1)治疗组。除正常对照组外，其他各组小鼠于实验首日上午尾静脉注射ConA20mg·kg-1，各给药组于首日、次日和第3日上午予小鼠灌胃给药1次;末次给药后4h，模型组和各给药组小鼠再次尾静脉注射ConA20mg·kg-1，禁食不禁水，8h后摘眼球取血，分离血清待检;断头处死动物，取肝左叶组织，一部分用体积分数为40%甲醛溶液固定，另一部分制成匀浆待检。1.5D?GalN致小鼠急性肝损伤模型的复制及分组、给药方法[3]分组和剂量设计同1.4，各治疗组小鼠每日灌胃给药1次，连续4d。末次给药后1h，除正常对照组外，其他组小鼠均以D?GalN800mg·kg-1腹腔注射，禁食不禁水，24h后摘眼球取血，分离血清待检;断头处死动物，取肝左叶组织，一部分用体积分数为40%甲醛溶液固定，另一部分制成匀浆待检。1.6血浆ALT、AST活性检测采用赖氏法，按试剂盒说明操作，采用722型紫外分光光度计于波长505nm处检测吸光值,制定标准曲线,换算成ALT、AST值。1.7肝组织SOD活性测定将肝组织制成100g/L匀浆，采用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性，按试剂盒说明操作。1.8组织病理学观察以体积分数为40%甲醛溶液固定肝组织,石蜡包埋切片，常规苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察、拍照。1.9统计学方法采用SPSS10.0软件包进行统计分析,多组计量资料分析采用One?wayANOVA法,多重比较采用LSD法。2结果2.1叶下珠复方Ⅱ号对ConA致小鼠急性肝损伤模型的保护作用由表1可知，模型组小鼠血清ALT、AST活性较正常对照组升高，肝组织SOD活性较正常对照组降低，差异均有显著性意义(P0.05)