一种远缘杂交离体授粉的育种方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113767846A(43)申请公布日2021.12.10(21)申请号202111101520.8(22)申请日2021.09.18(71)申请人禄劝普林生物科技有限责任公司地址651500云南省昆明市禄劝县屏山街道发明村(72)发明人谢伟明黄嘉威李志钧(74)专利代理机构北京沃知思真知识产权代理有限公司11942代理人唐丽萍(51)Int.Cl.A01H1/02(2006.01)权利要求书1页说明书2页附图1页(54)发明名称一种远缘杂交离体授粉的育种方法(57)摘要本发明公开了一种远缘杂交离体授粉的育种方法，属于育种技术领域，包括如下步骤：(1)制定工作流程，记录及计算花药开裂，胚珠受精的时间；(2)制备无菌胚珠；(3)制备无菌花粉；(4)将步骤(2)中制备的无菌胚珠在培养基上完成授粉；(5)授粉之后进行无菌培养。本申请方法是远缘有性杂交、离体授粉技术与组培技术的交叉育种方法。主要的方式是离体胚珠授粉，即离体培养未受精的胚珠，并在胚珠上进行授粉，最终在培养室内形成无菌的植株幼体。CN113767846ACN113767846A权利要求书1/1页1.一种远缘杂交离体授粉的育种方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制定工作流程，记录及计算花药开裂，胚珠受精的时间；(2)制备无菌胚珠；(3)制备无菌花粉；(4)将步骤(2)中制备的无菌胚珠在培养基上完成授粉；(5)授粉之后进行无菌培养。2.根据权利要求1所述一种远缘杂交离体授粉的育种方法，其特征在于，步骤(1)中所述的制定工作流程，记录及计算花药开裂，胚珠受精的时间，整个过程需要在花粉寿命之内完成。2CN113767846A说明书1/2页一种远缘杂交离体授粉的育种方法技术领域[0001]本发明属于育种技术领域，具体涉及一种远缘杂交离体授粉的育种方法。背景技术[0002]随着核果及仁果类育种工作的深入，种内遗传资源的日益枯竭，使得某些优良性状基因的缺乏，种内资源进行常规育种难以取得很大突破。远缘杂交可以拓宽植物遗传资源，是种质资源创新最有效的途径之一。[0003]在进行远缘杂交育种是常规的方式是通过人工授粉完成。往往存在受精前障碍和受精后障碍，其中受精前障碍普遍存在花粉或者雌蕊不亲和的问题，花粉管端会产生胼胝质导致无法受精、生理性落果、病虫害等问题，取得杂交种子的成本较高，且成功率较低。[0004]在常规的远缘杂交育种中，用桃子做母本会100％落果，因此考虑用离体的方式进行育种。发明内容[0005]本发明的目的是针对现有的问题，提供了一种远缘杂交离体授粉的育种方法。[0006]本发明是通过以下技术方案实现的：[0007]一种远缘杂交离体授粉的育种方法，包括如下步骤：[0008](1)制定工作流程，记录及计算花药开裂，胚珠受精的时间；[0009](2)制备无菌胚珠；[0010](3)制备无菌花粉；[0011](4)将步骤(2)中制备的无菌胚珠在培养基上完成授粉；[0012](5)授粉之后进行无菌培养。[0013]进一步地，步骤(1)中所述的制定工作流程，记录及计算花药开裂，胚珠受精的时间，整个过程需要在花粉寿命之内完成。[0014]本申请所用到的培养基为专利公开号CN111642399A一种适用于车厘子与李子杂交品种微体繁殖的培养基所记录的配方。[0015]本申请所使用的品种及材料为专利公开号CN112056206A一种蔷薇科李亚科跨属杂交育种的方法所记录的品种。[0016]本发明相比现有技术具有以下优点：[0017]1、本申请方法是远缘有性杂交、离体授粉技术与组培技术的交叉育种方法。主要的方式是离体胚珠授粉，即离体培养未受精的胚珠，并在胚珠上进行授粉，最终在培养室内形成无菌的植株幼体。[0018]2、相比传统的有性杂交，本申请有效克服了远缘杂交受精前障碍，提高了得到杂种种子或杂种胚的概率，通过后续微体嫁接或高枝嫁接，降低了育种成本及周期。[0019]3、本申请方法是远缘有性杂交、离体授粉技术及组培技术的交叉方法，后续可发展为体细胞融合育种，在亲缘关系较远。无法进行有性杂交时，可比如将苹果亚科与李亚科3CN113767846A说明书2/2页下的品种，进行细胞融合育种。附图说明[0020]图1为本申请远缘杂交离体授粉的育种方法的流程图。具体实施方式[0021]一种远缘杂交离体授粉的育种方法，包括如下步骤：[0022](1)制定工作流程，记录及计算花药开裂，胚珠受精的时间，所有工作需在花粉寿命之内完成；[0023](2)制备无菌胚珠；[0024](3)制备无菌花粉；[0025](4)将步骤(2)中制备的无菌胚珠在培养基上完成授粉；[0026](5)授粉之后进行无菌培养。[0027]为了对比本申请技术效果，申请