中药材金线莲种苗选育及快繁培育方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN103202227A*(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103202227103202227A(43)申请公布日2013.07.17(21)申请号201310094591.9(22)申请日2013.03.22(71)申请人赖新权地址517000广东省河源市东源县仙塘镇龙尾村中洞小组杆棚坑(72)发明人赖新权(74)专利代理机构东莞市中正知识产权事务所44231代理人张汉青(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页权利要求书1页说明书6页说明书6页(54)发明名称中药材金线莲种苗选育及快繁培育方法(57)摘要本发明公开了一种中药材金线莲种苗选育及快繁培育方法，采集野生金线莲植株，取其根部切成小段，消毒、冲洗，在25℃恒温培养，以获得纯化菌根真菌粘帚霉属AR-11或AR-13开唇兰小菇作为金线莲共生真菌，实现工业化生产金线莲共生苗。选择MS培养基作为金线莲的接种培养基，在MS培养基中还添加6-BA细胞分裂素和NAA植物生长调节剂，选择金线莲种植地，田间科学管理，本发明能提高金线莲组培苗的抗病能力及成活率，从而加快其繁殖速度，实现金线莲的工厂化育苗和大规模生产。CN103202227ACN10327ACN103202227A权利要求书1/1页1.中药材金线莲种苗选育及快繁培育方法，其特征在于：（1）采集野生金线莲植株，取其根部用无菌水冲洗干净，切成0.5-1cm根段，用0.1%HgCl2表面消毒6-8min，然后用无菌水冲洗净，再用75%的乙醇表面消毒3-5s，再用无菌水冲洗干净，将洗净的根段接种于PDA平皿中，在25℃恒温培养，待从根段内长出真菌菌丝后，挑取尖端菌丝纯化培养；以获得纯化菌根真菌粘帚霉属AR-11或AR-13开唇兰小菇作为金线莲共生真菌，实现工业化生产金线莲共生苗；（2）选择MS培养基作为金线莲的接种培养基，在MS培养基中还添加6-BA细胞分裂素和NAA植物生长调节剂，来促进金线莲丛生芽的快速生长；（3）金线莲种植地选择在海拔高度较高的林地溪沟边荫凉处，要求海拔400m以上，近阔叶林或针阔叶林交混地带，要求1月份平均气温≤10℃，7月份平均气温≤25℃，空气相对湿度≥70％。2CN103202227A说明书1/6页中药材金线莲种苗选育及快繁培育方法技术领域[0001]本发明涉及植物的选育栽培技术，具体地说是一种中药材金线莲种苗选育及快繁培育方法。背景技术[0002]现在生产的金线莲至少有3个种，即花叶开唇兰、台湾金线莲(A.formosanus)和高雄金线莲(A.koshunensis)。而金线莲的品质主要由其有效成分含量决定，通过比较不同金线莲药用成分含量，选择优质材料单株，通过外植体克隆技术繁殖优良单株；也可通过多倍体诱导、与当地原生种类杂交、筛选繁殖等方法选育适宜栽培且有效成分含量高的新品系。[0003]金线莲种子不具备胚乳，无发芽能力，只能在真菌共生下，才能促进种子的萌发，但发芽率较低，以分根法或扦插法方式繁殖，则需时长且繁殖倍数不高。发明内容[0004]本发明目的是提供一种中药材金线莲种苗选育及快繁培育方法。[0005]技术方案：中药材金线莲种苗选育及快繁培育方法，采集野生金线莲植株，取其根部用无菌水冲洗干净，切成0.5-1cm根段，用0.1%HgCl2表面消毒6-8min，然后用无菌水冲洗净，再用75%的乙醇表面消毒3-5s，再用无菌水冲洗干净，将洗净的根段接种于PDA平皿中，在25℃恒温培养，待从根段内长出真菌菌丝后，挑取尖端菌丝纯化培养；以获得纯化菌根真菌粘帚霉属AR-11或AR-13开唇兰小菇作为金线莲共生真菌，实现工业化生产金线莲共生苗。[0006]选择MS培养基作为金线莲的接种培养基，在MS培养基中还添加6-BA细胞分裂素和NAA植物生长调节剂，来促进金线莲丛生芽的快速生长；金线莲种植地选择在海拔高度较高的林地溪沟边荫凉处，要求海拔400m以上，近阔叶林或针阔叶林交混地带，要求1月份平均气温≤10℃，7月份平均气温≤25℃，空气相对湿度≥70％。[0007]有益效果：金线莲种子不具备胚乳，无发芽能力，在野生条件下，一般是在真菌共生下，才能促进种子的萌发，从而得以生长。离体快繁体系，采用人工种子离体萌发繁殖种苗，解决种苗生产过程中芽的增殖率较低、生长周期长、生根壮苗不均匀等方面仍存在的问题，提高种苗适栽能力。通过外植体克隆技术，扩大繁殖优良单株，提供优良品种种苗。[0008]本发明从野生金线莲菌根分离得到的共生真菌与金线莲组培幼苗建立共生关系获得共生苗，提高金线莲组培苗的抗病能力及成活率．最终达到工业化生产金线莲共生苗的目的。本发明通过观察前期培育获得的金线莲共生苗的菌根结构，以确认其共生关系的建立