睡莲人工杂交育种方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108243946A(43)申请公布日2018.07.06(21)申请号201810140923.5(22)申请日2018.02.11(71)申请人青岛农业大学地址266109山东省青岛市城阳区长城路700号(72)发明人郝青刘庆超徐丽慧刘庆华王奎玲(74)专利代理机构北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司11129代理人高芬芳(51)Int.Cl.A01H1/02(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图1页(54)发明名称睡莲人工杂交育种方法(57)摘要本发明公开了睡莲人工杂交育种方法。本发明所提供的睡莲人工杂交育种方法，包括如下步骤：(1)花粉采集；(2)柱头黏液的采集；(3)花粉在柱头黏液中的萌发；(4)杂交亲本选择；(5)人工授粉。本发明所提供的睡莲人工杂交育种方法利用柱头黏液量大可分离的特点，前期通过花粉在柱头黏液中的培养筛选适宜亲本能够避免盲目杂交授粉带来的巨大工作量，利用睡莲花期长，不存在父母本花期不遇现象，在田间对父本进行套袋，杂交时现采集花粉，避免花粉保存带来的花粉生活力的降低，这种睡莲杂交育种方法对于减轻育种工作强度，提高育种工作效率，加快睡莲新品种选育进程具有重要意义。CN108243946ACN108243946A权利要求书1/1页1.睡莲人工杂交育种方法，包括如下步骤：(1)花粉采集：在大蕾期采集父本的花药，将所述花药干燥至花药开裂散粉，收集花粉；(2)柱头黏液的采集：在花蕾期，对母本的花朵进行套袋，待母本的花朵开放第1天取母本柱头黏液；(3)花粉在柱头黏液中的萌发：将上述步骤(1)收集的花粉散落在步骤(2)的母本柱头黏液中，置于25℃～30℃培养箱中进行暗培养，2h～4h后在显微镜下观察拍照，统计花粉萌发率，以花粉管伸出超过花粉粒直径时为萌发标准；(4)杂交亲本选择：筛选步骤(3)中萌发率≥20％且花粉管伸长正常的组合作为杂交授粉的亲本组合；(5)人工授粉：对所述步骤(3)筛选出的亲本组合进行人工授粉，收集杂交种子。2.根据权利要求1所述的睡莲人工杂交育种方法，其特征在于：所述步骤(1)中所述采集的时间为开花前两天的早上8时～10时。3.根据权利要求1或2所述的睡莲人工杂交育种方法，其特征在于：所述干燥为自然风干。4.根据权利要求1所述的睡莲人工杂交育种方法，其特征在于：所述步骤(5)中人工授粉的方法为：在所述亲本花朵开放之前，挑选发育时期一致的花蕾，用硫酸纸袋套袋，至母本花朵开放第1天，柱头分泌粘液时，采集套袋父本的花粉放入母本的柱头黏液中进行人工授粉。5.根据权利要求4所述的睡莲人工杂交育种方法，其特征在于：所述步骤(5)中人工授粉后还包括授粉后的母本入水发育，等待果实成熟，收集杂交种子的步骤。6.根据权利要求5所述的睡莲人工杂交育种方法，其特征在于：所述收集杂交种子包括如下步骤：将装有成熟果实的网袋收起，内部的硫酸纸袋起到防虫的作用；将硫酸纸中的种子轻轻沾水使其洒落水中，以避免其他杂质一起落入盆中影响种子清洗；用纱布轻轻揉搓种子，去除种子外的膜囊，播种，或将种子保存于盛有蒸馏水的5ml离心管中，置于0℃～4℃冰箱中保存，每隔2周～3周更换一次水。7.根据权利要求1所述的睡莲人工杂交育种方法，其特征在于：所述步骤(2)中所述母本柱头黏液是用2ml～5ml的针管吸取，放入离心管中，并置于冰盒中带回实验室，用于花粉萌发实验。8.根据权利要求1所述的睡莲人工杂交育种方法，其特征在于：所述步骤(3)中还包括如下步骤：将步骤(2)的母本柱头黏液滴于凹槽载玻片上，每个品种的柱头黏液各滴3～4个凹槽，用解剖针将所述步骤(1)采集的花粉均匀的散落在黏液中，盖上盖玻片，放在铺有湿润滤纸的培养皿中，置于25℃～30℃培养箱中进行暗培养，2h～4h后在显微镜下观察拍照，每个凹槽观察不少于6个视野，统计花粉萌发率，以花粉管伸出超过花粉粒直径时为萌发标准。9.权利要求1-8中任一所述的睡莲人工杂交育种方法在睡莲杂交育种中的应用。2CN108243946A说明书1/5页睡莲人工杂交育种方法技术领域[0001]本发明涉及植物杂交育种领域，特别涉及睡莲人工杂交育种方法。背景技术[0002]睡莲是睡莲科(Nymphaeaceae)睡莲属(Nymphaea)多年生水生宿根草本花卉。睡莲花色丰富、姿态优美、花期长，具有很高的观赏价值。睡莲还有多种其它重要用途，可以吸收水体中一些类似银、铅、苯酚等有毒物质，对水体具有净化与修复功能，在水体净化、城市绿化和景观美化中扮演着非常重要的角色；全株可做绿肥，根茎可入药，花可作茶用等。[0003]根据对生存温度条件要求的不同，把睡莲区分为耐寒睡莲(Hardywaterlily)和热带睡莲(Tropicalwaterli