一种从蜂王浆中提取10-羟基-2-癸烯酸的工艺.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN103044240A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN103044240A(43)申请公布日2013.04.17(21)申请号201110320965.5(22)申请日2011.10.15(71)申请人山东华康蜂业有限公司地址276500山东省日照市莒县信中路5号山东华康蜂业有限公司(72)发明人张其安杨少波(51)Int.Cl.C07C59/42(2006.01)C07C51/48(2006.01)C07C51/47(2006.01)权利要求书权利要求书11页页说明书说明书33页页(54)发明名称一种从蜂王浆中提取10-羟基-2-癸烯酸的工艺(57)摘要本发明公布了大孔吸附树脂法从蜂王浆中提取10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)的工艺。蜂王浆溶于95％乙醇，经超声提取；提取液加去离子水稀释后用大孔吸附树脂X-5吸附提取液中的10-HAD；吸附后的树脂装入层析柱，以75％～95％的乙醇解吸，收集含10-HAD的解吸液；洗脱液蒸发浓缩、冷冻干燥获得纯度≥92.5％的10-HAD。CN10342ACN103044240A权利要求书1/1页1.一种大孔吸附树脂法从蜂王浆中提取10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)的方法，该方法包括以下工艺步骤：(1)蜂王浆经95％乙醇溶解后，超声提取；(2)提取液用去离子水稀释后与大孔吸附树脂按一定比例混合，150r/min振荡吸附3h～4h；(3)吸附后树脂装柱；先以20％的乙醇洗脱杂质，然后以75％～95％的乙醇洗脱10-HAD；(4)将收集到的洗脱液蒸发浓缩、冷冻干燥所得白色物质即为10-HAD。2.根据权利要1所述的10-HDA提取工艺，其特征在于，所述步骤(1)蜂王浆与95％乙醇比例为1∶3(m/v)。3.根据权利要1所述的10-HDA提取工艺，其特征在于，所述步骤(2)提取液用4～5倍体积的蒸馏水稀释。4.根据权利要1所述的10-HDA提取工艺，其特征在于，所述步骤(2)大孔吸附树脂为X-5树脂。5.根据权利要1所述的10-HDA提取工艺，其特征在于，所述步骤(2)提取液与大孔树脂X-5的比例为1∶10(m/v)。6.根据权利要1所述的10-HDA提取工艺，其特征在于，所述步骤(3)解吸液为75％～95％的乙醇。2CN103044240A说明书1/3页一种从蜂王浆中提取10-羟基-2-癸烯酸的工艺技术领域[0001]本发明涉及一种从蜂王浆中提取10-羟基-2-癸烯酸的工艺，特别是一种大孔吸附树脂吸附层析法提取癸烯酸的工艺。背景技术[0002]蜂王浆又名蜂皇浆，是由11～21日龄的青年工蜂下咽头腺和大颚腺分泌的，主要用于饲喂蜂王和幼虫，呈乳白色、淡黄色或浅橙色半透明为粘稠浆状，具有特殊香味、味酸、涩、辛、略甜，富含蛋白质、糖类、脂肪酸、维生素、游离氨基酸等生理活性物质。蜂王浆具有活化细胞、促使伤口愈合、促进内分泌、增加食欲、增强体力、防治骨质疏松、防衰老、安神、抗菌、抗癌、抗辐射等多种生理活性作用，具有极高的医药和保健价值。10-羟基-2-癸烯酸(10-Hydroxy-2-Decenoicacid，10-HDA)又称王浆酸，是蜂王浆中主要的活性成分，是德国科学家D.J朗格于1921年首次在工蜂上颚腺中发现的。1957年，A.Butenandt首先报道从蜂王浆中分离得到10-HAD。此后，国内外学者从性质、结构、药理及测定方法等方面对10-HAD进行了较为深入的研究。10-HAD是一种不饱和脂肪酸，分子式为HO-CH2-(CH2)6-CH＝CH-COOH(C10H18O3)，分子量186.25，白色絮状结晶或针状结晶，不易吸潮，在高温条件下易变为油状或焦化，低温冷冻干燥时不易升华。熔点为64℃，溶于甲醇、乙醇、乙醚和氯仿，微溶于丙酮，难溶于水。对石蕊试纸显酸性，能使溴水和高锰酸钾溶液迅速褪色，对三氯化铁不显紫色。[0003]研究表明，10-HAD对人和动物具有多方面的药理作用。第一，抑菌杀菌作用，10-HAD对金黄葡萄球菌、链球菌、变形杆菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、结核杆菌星状癣菌、表皮癣菌等具有抑菌杀菌作用，10-HAD对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄葡萄球菌的最低以菌浓度(MIC)分别为0.625mg/mL、1.25mg/mL、2.5mg/mL；第二，抗癌、抗肿瘤作用，10-HAD可通过刺激环状-腺磷苷的合成，使蛋白质螺旋结构和氨基酸序列正常化，从而使受肿瘤破坏的结构正常化，因而对癌细胞具有抑制作用；第三，抗辐射作用，10-HAD具有保护和修复蛋白质、DNA、RNA的作用，所以它能对急性辐射损伤起到防治作用；第四，降血脂作用，10-HAD能减少饭后脂肪堆积，防止脂类物质的合成，是改善血液中脂肪含量的一部分因素，对高血脂症具有良好的治疗作