一种鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108362784A(43)申请公布日2018.08.03(21)申请号201810008004.2(22)申请日2018.01.04(71)申请人浙江大学地址310058浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号(72)发明人胡福良张言政郑火青张翠平吴雨祺(74)专利代理机构杭州求是专利事务所有限公司33200代理人赵杭丽(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图1页(54)发明名称一种鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的方法(57)摘要本发明提供一种鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的方法，根据两种蜂蜜中烷烃成分差异达到鉴别两者的目的。蜂蜜样品用石油醚萃取后进行气相色谱质谱检测，结果显示中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜在烷烃成分上存在差异，中蜂蜂蜜含有C37烷烃，意蜂蜂蜜含有C31烷烃。经大量样本检测分析后确定此差异成分仅与蜂种来源有关，排除了植物源对鉴别的影响。差异性烷烃成分在蜂蜜中稳定存在，不受浓缩加工和货架期的影响。本发明方法设计合理，方便快捷，鉴别准确，适合原蜜与商品蜜蜂种来源的鉴别，也适用于一定比例意蜂蜂蜜掺入中蜂蜂蜜中的鉴定。CN108362784ACN108362784A权利要求书1/1页1.一种鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的方法，其特征在于，通过以下步骤实现：(1)蜂蜜中烷烃成分萃取：称取蜂蜜20g，放于50mL离心管中，加入20mL纯水，涡旋震荡混匀后15000g常温离心10min，弃去上清液，沉淀加石油醚60-90℃10mL，涡旋震荡10-15分钟，常温条件下8000g离心10min，吸取上清液于15mL离心管中，得到蜂蜜萃取液H1；(2)蜂蜜萃取液的浓缩：用氮吹仪对蜂蜜萃取液H1进行浓缩，氮吹仪加热温度控制在30-40℃，将萃取液浓缩至1-2mL，停止氮吹，得到萃取液H2；(3)正三十烷烃标准工作液的配制(1mg/mL)：称取50mg正三十烷标准品于50mL容量瓶，用石油醚60-90℃溶解并定容，-20℃冰箱保存；(4)气相色谱-质谱检测：萃取液H2经孔径为0.22μm的有机相滤膜过滤后取1mL于样品瓶中进行检测；(5)特征烷烃成分峰识别：意蜂蜂蜜在21.3min有特征峰，中蜂蜂蜜在29.2min有特征峰，21.3min特征峰为C31烷烃成分，29.2min特征峰为C37烷烃成分，根据两种蜂蜜烷烃成分组成的差异，达到鉴别目的。2.根据权利要求1所述的一种鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的方法，其特征在于，气相色谱条件：色谱柱：InertCap5，0.25mm×30m×0.25μm，或者相当；进样口温度：300℃；升温程序：初始炉温为120℃，持续1min；以30℃/min的速度升温至180℃，持续1min；以10℃/min的速度升温至300℃，持续15min；进样体积：1μL，分流进样；载气：≥99.999％高纯氮，流速为1mL/min；质谱条件：传输管温度：300℃；离子源温度：270℃；四极管温度：160℃；扫描模式：全扫描；扫描范围：50-550nm。3.根据权利要求1所述的一种鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的方法，其特征在于，C37烷烃为中蜂蜂蜜特有成分，C31烷烃为意蜂蜂蜜特有成分，步骤(5)根据两种蜂蜜烷烃成分差异，达到鉴别两者的目的。4.根据权利要求1所述的一种鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的方法在中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜鉴别中的应用。2CN108362784A说明书1/4页一种鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的方法技术领域[0001]本发明属于蜂产品领域，主要涉及一种鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜的方法，是通过仪器分析的方法鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜。技术背景[0002]蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物结合后，经过在巢脾内转化、脱水、贮存至成熟的过程而成的天然甜物质。蜂蜜中蜜蜂的分泌物主要是一些蛋白质，其中包括一些消化酶和王浆主蛋白等。[0003]意大利蜜蜂(Apismelliferaligustica，简称意蜂)是西方蜜蜂的一个亚种，原产于意大利，产蜜能力强，生产蜂王浆的能力亦强，是蜜浆兼产的理想品种，而且也是花粉生产的理想品种，还可用于蜂胶生产。是世界范围内广泛养殖的蜜蜂品种，也是目前中国国内蜜蜂养殖的主要品种。[0004]中华蜜蜂(Apisceranacerana，简称中蜂)是东方蜜蜂的一个亚种，是中国独有的蜜蜂品种，有利用零星蜜源植物、采集力强、利用率较高、采蜜期长及适应性、抗螨抗病能力强，消耗饲料少等意大利蜂无法比拟的优点，非常适合中国山区定点饲养，但其蜂蜜产量较低，不生产蜂胶和蜂王浆。[0005]中蜂蜂蜜也称“土蜂蜜”，其营养和保健功效深受消费者信赖，然而因产量较低，其市场价格是普通意蜂蜂蜜的好几倍。一