一种用于测定蜂蜜样品抗氧化活性的标志物组合及方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109580861A(43)申请公布日2019.04.05(21)申请号201811174835.3(22)申请日2018.10.10(71)申请人中国疾病预防控制中心营养与健康所地址100050北京市西城区南纬路27号(72)发明人沈葹王晶波张双庆卓勤陈曦刘婷婷秦文王丽媛(74)专利代理机构中国国际贸易促进委员会专利商标事务所11038代理人刘海罗(51)Int.Cl.G01N30/86(2006.01)权利要求书2页说明书22页附图15页(54)发明名称一种用于测定蜂蜜样品抗氧化活性的标志物组合及方法(57)摘要本发明属于检测领域，特别是食品检测领域。具体地，本发明涉及一种用于测定蜂蜜样品的抗氧化活性的标志物组合及方法。更具体地，本发明涉及一种用于测定或评价蜂蜜药品抗氧化活性的标志物组合，包括下述标志物：总酚酸、总黄酮、染料木苷、甲硫氨酸和3,4-二羟基苯甲酸。本发明首次通过细胞水平评价蜂蜜的抗氧化活性，以酚酸、黄酮、氨基酸的多维靶标分析，基于化学计量统计学原理构建蜂蜜抗氧化组效关系营养谱的研究方法，对于加强蜂蜜的营养学研究，提高蜂蜜质量，保证消费者的健康，开发蜂蜜在食品化妆品等多工业消费品领域的健康使用等具有重要意义。CN109580861ACN109580861A权利要求书1/2页1.一种用于测定或评价蜂蜜药品抗氧化活性的标志物组合，包括下述标志物：总酚酸、总黄酮、染料木苷、甲硫氨酸和3,4-二羟基苯甲酸；优选地，所述标志物组合还包括选自酪氨酸、牡荆素、黄芩苷、异亮氨酸和异鼠李素中的任意一种或多种；更优选地，所述标志物组合还包括选自对香豆素、天冬氨酸、白杨素、咖啡酸和谷氨酸中的任意一种或多种；进一步优选地，所述标志物组合还包括选自隐绿原酸、赖氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸和没食子酸中的任意一种或多种；特别优选地，所述标志物组合还包括选自半胱氨酸、生松素、绿原酸、槲皮素和苏氨酸中的任意一种或多种；最优选地，所述标志物组合还包括选自樱花亭、高良姜素、甘氨酸、木犀草素、脯氨酸和丁香酸中的任意一种或多种。2.根据权利要求1所述的标志物组合，其不包括选自下述化合物中的任意一种或多种：阿魏酸、芥子酸、刺芒柄花素、柚皮素、山奈酚、非瑟酮、橙皮素、短叶松素、槲皮苷、橙皮苷、异樱花亭、花旗松素、杨梅素、丙氨酸、精氨酸、组氨酸和丝氨酸。3.一种测定蜂蜜样品的抗氧化活性的方法，包括下述步骤：(1)测定该蜂蜜样品中的各标志物的含量，其中所述标志物为权利要求1所述的标志物组合中的标志物；(2)将每个标志物的含量乘以每个标志物的相关系数，如此每个标志物得到一个乘积，其中所述相关系数如说明书中的表8所示；(3)将步骤(2)中的各个乘积进行累加求总和，将得到的总和作为抗氧化活性数值。4.一种测定不同蜂蜜样品的抗氧化活性高低的方法，其通过权利要求3所述的方法得到不同蜂蜜样品的抗氧化活性数值，然后比较不同蜂蜜样品的抗氧化活性数值的大小。5.一种测定蜂蜜样品中的成分的抗氧化活性的方法或者一种测定蜂蜜样品中的成分与该成分抗氧化活性的相关性的方法，包括下述步骤：将该成分的含量以及各标志物的含量作为变量X，细胞抗氧化能力值作为变量Y，采用偏最小二乘回归法分析变量X和变量Y构成的矩阵，得到表示变量Y与变量X的系统相关程度的相关系数；其中，所述标志物为权利要求1所述的标志物组合中的标志物。6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述成分的含量以及各标志物的含量以高效液相色谱或超高效液相色谱的峰面积表示。7.根据权利要求6所述的方法，其中，总酚含量以每百克蜂蜜中没食子酸当量计，和/或总黄酮含量以每百克蜂蜜中槲皮素当量计。8.根据权利要求5所述的方法，其中，所述偏最小二乘回归法通过Simcap13.0软件进行；优选地，模型参数R2Y＝0.883，Q2＝0.706。9.根据权利要求5所述的方法，其中，将变量X的原始数据进行均一化和log转换，和/或将变量Y的原始数据进行均一化和log转换。10.一种测定蜂蜜样品中的成分的抗氧化活性的装置或者一种测定蜂蜜样品中的成分与其抗氧化活性的相关性的装置，包括：高效液相色谱或超高效液相色谱仪、质谱仪和处理器，2CN109580861A权利要求书2/2页其中，所述处理器能够通过运行偏最小二乘回归法得到权利要求5所述的方法中的相关系数。11.根据权利要求10所述的装置，其中，所述质谱仪为三重四级杆质谱仪；优选地，所述装置还包括显示器和/或存储介质。12.检测权利要求1或2所述的标志物组合的试剂或试剂组合在制备测定蜂蜜样品的抗氧化活性或者测定蜂蜜样品中的成分的抗氧化活性的药物中的用途。3CN109580861A说明书1/22页一种用于测定蜂蜜样品抗氧化活性的标志物组合及方法技