一种从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111434243A(43)申请公布日2020.07.21(21)申请号201910060797.7(22)申请日2019.01.23(71)申请人重庆悬泉蜂业有限公司地址409100重庆市石柱土家族自治县万安街道都督大道金御江山35号附40号3楼(72)发明人肖维刚(51)Int.Cl.A23L21/25(2016.01)A23L29/30(2016.01)A23L29/00(2016.01)C12N9/00(2006.01)C08B37/00(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法(57)摘要本发明公开了一种从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法，包括活性生物酶与多糖的分离、活性生物酶提纯、多糖提纯和活性物质保存使用，活性生物酶与多糖的分离，通过盐溶液提取法进行分离提纯，在蜂蜜中添加缓冲液，充分混合搅拌，控制中性盐浓度和混合环境，混合后溶液使用盐析法提取活性酶混合物，在蜂蜜的混合溶液中继续添加中性盐，盐析的过程中将溶液的PH设定在各个活性酶的等电点。本发明使用碱性磷酸盐使得蜂蜜中的活性生物酶与中性盐结合，从而使得活性生物酶与多糖相互之间明显的分离开来，便于后期的对两者分别进行提纯，操作环境控制在低温，中性偏碱性环境中，能够有效的避免其中活性生物酶的失活，以及避免蛋白质的水解。CN111434243ACN111434243A权利要求书1/1页1.一种从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法，其特征在于，所述从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法包括：活性生物酶与多糖的分离、活性生物酶提纯、多糖提纯和活性物质保存使用；S1、活性生物酶与多糖的分离：通过盐溶液提取法进行分离提纯，在蜂蜜中添加缓冲液，充分混合搅拌，控制中性盐浓度和混合环境；S2、混合后溶液使用盐析法提取活性酶混合物，在蜂蜜的混合溶液中继续添加中性盐，盐析的过程中将溶液的PH设定在各个活性酶的等电点；S3、析出蛋白质沉淀物，固液过滤分离出固体沉淀物和蜂蜜剩余溶液；S4、活性生物酶提纯：对固体沉淀物使用透析法，将析出的沉淀物与缓冲液再次混合成溶液，使用透析袋分离大分子活性生物酶和中性盐溶液，滞留在透析袋中物质为活性生物酶；S5、多糖提纯：蜂蜜剩余溶液使用膜分离法去除杂质，使用纤维滤器和半透膜进行分离，输出的为中性盐以及小分子杂质的混合水溶液，留置在纤维滤器内半透膜上的为多糖混合物。2.根据权利要求1所述的一种从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法，其特征在于，所述活性生物酶与多糖的分离中分离环境的控制，温度0℃-5℃，无菌无尘操作箱，提取缓冲液为0.02-0.05M磷酸盐等渗盐溶液，提取过程中加入少量NaCl等中性盐，一般以0.15mol/L浓度为宜，环境PH值中性7.0以上，充分搅拌混合。3.根据权利要求1所述的一种从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法，其特征在于，所述活性生物酶与多糖的分离中的中性盐采用磷酸铵(NH4)3PO4，磷酸铵在20℃时的溶解度为28.3g/100ml，PH值控制在6.0以上，盐析的过程中将溶液的PH设定在各个活性酶的等电点。4.根据权利要求1所述的一种从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法，其特征在于，所述活性生物酶提纯中缓冲液为0.02-0.05M磷酸盐等渗盐溶液，所述活性生物酶提纯使用分离筒，将析出的沉淀物与缓冲液再次混合成溶液，分离筒内为水，所述分离筒内安装有内置透析袋，混合溶液灌装入内置透析袋内，对内置透析袋内溶液进行缓慢的变速搅拌，使用搅拌桨边搅拌边透析。5.根据权利要求1所述的一种从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法，其特征在于，所述多糖提纯中半透膜安装在纤维滤器内，将蜂蜜剩余溶液逐渐输入到纤维滤器内，经过内部的半透膜进行过滤，留置在内部的多糖混合物从半透膜上刮取下来即可。6.根据权利要求1所述的一种从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法，其特征在于，提取出来的活性生物酶需要保存，活性生物酶制备成冻干粉或者以晶体状态进行保存，-15℃低温冷冻环境保存，保存时间达到8年，多糖混合物可直接使用投入生产使用。2CN111434243A说明书1/4页一种从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法技术领域[0001]本发明涉及蜂蜜的加工技术领域，尤其涉及一种从蜂蜜中提取活性物质的深加工萃取方法。背景技术[0002]蜂蜜是蜜蜂采集植物花蜜或甘露、蜜露，加入自身消化道的分泌液后，在蜂巢内酿制并存储起来供日后食用的一种食品，蜂蜜中含有180多种不同的物质，其主要的成分是糖类、包括单糖、二糖、低聚糖和多糖等，单糖中的葡糖糖和果糖占总糖的85％-95％，此外蜂蜜中还含有多种有机酸、氨基酸、蔗糖、维生素、矿物质、酵素、芳香物、色素、激