一种胶原保湿防晒隔离霜及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112336677A(43)申请公布日2021.02.09(21)申请号202011321716.3A61K8/92(2006.01)(22)申请日2020.11.23A61K8/27(2006.01)A61Q17/04(2006.01)(71)申请人肖暾A61Q19/00(2006.01)地址210000江苏省南京市建邺区燕山路A61Q19/08(2006.01)118号C12N15/81(2006.01)(72)发明人肖暾C12N15/62(2006.01)(74)专利代理机构北京华际知识产权代理有限C07K19/00(2006.01)公司11676C12R1/84(2006.01)代理人俞旋(51)Int.Cl.A61K8/98(2006.01)A61K8/34(2006.01)A61K8/49(2006.01)A61K8/65(2006.01)A61K8/73(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种胶原保湿防晒隔离霜及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种胶原保湿防晒隔离霜及其制备方法，包括，酵母发酵提取物、氧化锌、玫瑰精油、蜂蜜、甘油、透明质酸、增稠剂、水。本发明，通过基因工程手段，将重组基因TAT‑Hlcollagen转录到毕赤酵母体内，使穿膜肽‑类人胶原蛋白复合体在毕赤酵母中同时大量表达，可以用于皮肤损伤治疗、食品添加剂、组织工程、化妆品等领域，具有良好的社会经济价值。穿膜肽TAT可以携带胶原蛋白透过细胞膜，使胶原蛋白直达细胞内部，真正发挥补水保湿及抗老化的作用。向毕赤酵母发酵液加入茶叶，低温发酵，可以获得含茶多酚的毕赤酵母，具有超强的抗氧化能力，而且防辐射、抗衰老，添加到胶原保湿防晒隔离霜能达到良好的防晒效果。CN112336677ACN112336677A权利要求书1/1页1.一种胶原保湿防晒隔离霜，包括酵母发酵提取物5-10份、氧化锌2-6份、玫瑰精油1-5份、蜂蜜0.5-2份、甘油3-8份、透明质酸5-10份、增稠剂0.5-2份、水2-8份。2.根据权利要求1所述的一种胶原保湿防晒隔离霜，其特征在于：所述按照重量计酵母发酵提取物8份、氧化锌3份、玫瑰精油2份、蜂蜜0.5份、甘油8份、透明质酸6份、增稠剂1份、水5份。3.根据权利要求2所述的一种胶原保湿防晒隔离霜，其特征在于：所述酵母发酵提取物是由基因工程酵母菌毕赤酵母发酵获得的。4.根据权利要求3所述的一种胶原保湿防晒隔离霜，其特征在于：所述毕赤酵母质粒含有穿膜肽TAT-类人胶原蛋白(hlcollagen)重组基因，并在该序列5’端和3’端分别引入组氨酸纯化标签，所设计的基因序列全长828bp，通过PCR技术扩增穿膜肽TAT基因与类人胶原蛋白重组基因TAT-Hlcollagen，两端分别引入EcoRI和BamHⅠ酶切位点，经双酶切后，连接到毕赤酵母表达载体pGAPHαA上，得到重组表达载体pGAPHαA-Tat-Hlcollagen。5.根据权利要求4所述的一种胶原保湿防晒隔离霜，其特征在于：所述毕赤酵母进行PCR检测：根据设计的一对TAT-Hlcollagen基因引物，电泳检测出现了与基因引物相同的条带，而未转化的毕赤酵母则没有扩增出条带，证明TAT-Hlcollagen重组基因己经整合进毕赤酵母的基因组中,获得阳性毕赤酵母。6.根据权利要求5所述的一种胶原保湿防晒隔离霜，其特征在于：所述阳性毕赤酵母菌株接种于每升含有用蛋白胨20克，酵母粉10克，酵母胆碱YNB13.4克，甘油10毫升，甲醇10毫升，磷酸钾缓冲液0.1摩尔，生物素0.4毫克的液体培养基中摇瓶，28℃下250rpm培养18-24h后，离心并收集菌体。7.根据权利要求6所述的一种胶原保湿防晒隔离霜，其特征在于：所述菌体用扩大培养液重悬接种，扩大增殖培养液每升含有蛋白胨20克，酵母粉10克，酵母胆碱YNB13.4克，甲醇21.6毫升，磷酸钾缓冲液0.1摩尔，生物素0.4毫克；25-35℃，100rpm-300rpm，摇床培养3-10D；发酵期间需每12h补充甲醇诱导维持体积比的1.8％-2.5％的甲醇浓度。8.根据权利要求7所述的一种胶原保湿防晒隔离霜，其特征在于：所述毕赤酵母发酵液加入茶叶继续发酵，不再添加甲醇，20℃低温发酵2-3D，获得含茶多酚的毕赤酵母。9.根据权利要求8所述的一种胶原保湿防晒隔离霜，其特征在于：所述茶叶为乌龙茶、碧螺春、龙井茶、铁观音、武夷岩茶，其中的一种。10.一种胶原保湿防晒隔离霜的制备方法，包括以下具体步骤：步骤一：将酵母发酵液过滤去除茶叶，真空干燥，5-10℃超微研磨，获得酵母发酵提取物；步骤二：将酵母发酵提取物、玫瑰精油、氧化锌、水，在30℃，150-300