用于收集、储存和分析生物样品的细胞盒.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114207448A(43)申请公布日2022.03.18(21)申请号202080056138.7(74)专利代理机构北京安信方达知识产权代理(22)申请日2020.06.04有限公司11262代理人刘晓杰(30)优先权数据62/858,7732019.06.07US(51)Int.Cl.G01N35/00(2006.01)(85)PCT国际申请进入国家阶段日G01N35/10(2006.01)2022.02.07(86)PCT国际申请的申请数据PCT/US2020/0361972020.06.04(87)PCT国际申请的公布数据WO2020/247684EN2020.12.10(71)申请人蜂巢生物技术公司地址美国马萨诸塞州(72)发明人托德·吉拉恩权利要求书10页说明书28页附图12页(54)发明名称用于收集、储存和分析生物样品的细胞盒(57)摘要本文公开了用于储存、收集和分析生物样品的细胞盒。所述细胞盒可以使得能够容易地收集样品并使用半透膜密封微孔阵列以用于单细胞的稳定储存和未来处理。本文还公开了包括一个或多个所述盒的系统和试剂盒。所述盒、系统和试剂盒可以用于创建带有条形码的单细胞测序文库。本文还描述了使用所述盒、系统和试剂盒的方法。CN114207448ACN114207448A权利要求书1/10页1.一种用于收集、储存或分析生物颗粒的盒，所述盒包括：(a)柱塞组件，其包括柱塞，其中所述柱塞具有底部表面；(b)膜组件，其包括：i.半透膜，其包括膜顶部表面和膜底部表面，以及ii.膜框架，其被构造成附接于所述柱塞，其中所述半透膜附接于所述膜框架，并且其中所述膜组件被构造成使得当所述膜框架附接于所述柱塞组件时，所述柱塞的所述底部表面的至少一部分与所述膜顶部表面接触；以及(c)装载组件，其包括微孔阵列和支撑所述微孔阵列的基部，其中所述微孔阵列包括顶部表面，所述顶部表面包括在其中移位的多个微孔，其中所述装载组件被构造成使得当所述膜组件附接于所述装载组件时，所述微孔阵列的所述顶部表面的至少一部分与所述膜底部表面接触；并且其中所述膜底部表面与所述微孔阵列的所述顶部表面之间的所述接触被构造成将一个或多个生物颗粒保留在所述微孔阵列中。2.根据权利要求1所述的盒，其中所述盒包括锁定机构，所述锁定机构被构造成将所述柱塞组件和所述膜组件与所述装载组件锁定在适当的位置。3.根据权利要求2所述的盒，其中所述锁定机构被构造成维持所述微孔阵列的所述顶部表面与所述膜底部表面之间的所述接触。4.根据权利要求1至3中任一项所述的盒，其中所述柱塞组件包括顶部锁定构件。5.根据权利要求4所述的盒，其中所述基部包括被构造成接合所述顶部锁定构件的底部锁定构件。6.根据权利要求5所述的盒，其中所述底部锁定构件被构造成通过弹夹器机构接合所述顶部锁定构件。7.根据权利要求5或6所述的盒，其中所述微孔阵列的所述顶部表面与所述膜底部表面之间的所述接触是通过接合所述顶部锁定构件和所述底部锁定构件来维持的。8.根据权利要求4所述的盒，其中所述膜组件包括被构造成接合所述顶部锁定构件的底部锁定构件。9.根据权利要求1至8中任一项所述的盒，其中所述柱塞的所述底部表面包括弯曲表面或平坦表面。10.根据权利要求1至9中任一项所述的盒，其中所述柱塞的所述底部表面包括凸形表面。11.根据权利要求1至10中任一项所述的盒，其中所述柱塞的所述底部表面包括弹性体表面。12.根据权利要求1至11中任一项所述的盒，其中所述柱塞的所述底部表面是圆形的。13.根据权利要求1至12中任一项所述的盒，其中所述柱塞包括包含一个或多个切口的侧表面。14.根据权利要求13所述的盒，其中所述一个或多个切口是在所述柱塞上竖直延伸的凹槽。15.根据权利要求1至14中任一项所述的盒，其中所述柱塞组件包括刚性顶部表面。2CN114207448A权利要求书2/10页16.根据权利要求1至14中任一项所述的盒，其中所述柱塞组件包括顶部表面，所述顶部表面包括可以用来设定或操纵所述柱塞组件或所述盒的位置的机构。17.根据权利要求16所述的盒，其中所述柱塞组件的所述顶部表面上的所述机构包括手柄。18.根据权利要求1至17中任一项所述的盒，其中所述半透膜具有至少1nm、至少10nm、至少20nm、至少30nm、至少40nm、至少50nm、至少75nm、至少100nm、至少200nm、至少300nm、至少400nm、至少500nm、至少600nm、至少700nm、至少800nm、至少900nm或至少1000nm的平均孔隙直径。19.根据权利要求1至18中任一项所述的盒，其中所述半透膜具有至多20nm、至多30nm、至多40nm、至多50nm、至多75nm、至多