一种马属动物胚胎切割操作液配制方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103756956103756956A(43)申请公布日2014.04.30(21)申请号201310588186.2(22)申请日2013.11.21(71)申请人青岛德瑞骏发生物科技有限公司地址266200山东省青岛市即墨市文化路57号申请人伊犁德瑞骏发生物科技有限公司青岛德瑞鳌蓝马术有限公司(72)发明人张志鹏张肖军马玉萍(51)Int.Cl.C12N5/073(2010.01)权利要求书1页权利要求书1页说明书4页说明书4页(54)发明名称一种马属动物胚胎切割操作液配制方法和应用(57)摘要本发明公开了一种马属动物胚胎切割操作液配制方法和应用，其中，胚胎切割操作液包括乳酸钠混合液、青霉素、链霉素，以及牛血清白蛋白、犊牛血清和灭活马血清中的一种、两种或三种；其配制方法包括：将乳酸钠混合液置于37℃的恒温箱中0.5-6小时后，备用，按照组分含量向乳酸钠混合液中加入青霉素、链霉素以及牛血清白蛋白、犊牛血清和灭活马血清中的一种或两种或三种，即得到胚胎切割操作液。适用于马、牛、驴的非手术法胚胎移植技术。本发明的有益效果是：具有取材方便、价格低廉、配制简单、使用方便等优点，非常适用于马属动物非手术法胚胎移植的规模化生产，有利于胚胎移植技术的推广应用。CN103756956ACN1037569ACN103756956A权利要求书1/1页1.马属动物胚胎切割操作液，其特征在于，所述胚胎切割操作液包括乳酸钠混合液、青霉素、链霉素，以及牛血清白蛋白、犊牛血清和灭活马血清中的一种、两种或三种。2.根据权利要求1所述的马属动物胚胎切割操作液，其特征在于，所述乳酸钠混合液包括乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁和黄芪多糖中的一种或多种。3.根据权利要求1或2所述的马属动物胚胎切割操作液，其特征在于，所述胚胎切割操作液中各组分的含量为：每1000ml乳酸钠混合液中含有青霉素30-180万单位、链霉素20-200万单位，以及牛血清白蛋白0.05%-1.5%、犊牛血清0.5%-15%和/或灭活马血清0.5%-14%。4.根据权利要求1或2所述的马属动物胚胎切割操作液，其特征在于，所述胚胎切割操作液中各组分的含量为：每1000ml乳酸钠混合液中含有青霉素50-150万单位、链霉素50-150万单位，以及牛血清白蛋白0.1%-0.9%、犊牛血清1%-10%和/或灭活马血清1%-10%。5.根据权利要求1-4任一项所述的马属动物胚胎切割操作液，其特征在于，所述乳酸钠混合液中各组分的含量为：每1000ml混合液中含有乳酸钠1-7g、氯化钠1-5g、氯化钾2-7g、氯化钙0.5-2g、氯化镁0.05-0.5g和黄芪多糖0.01-0.3g。6.根据权利要求1-5任一项所述的马属动物胚胎切割操作液，其特征在于，所述乳酸钠混合液中各组分的含量为：每1000ml混合液中含有乳酸钠3-7g、氯化钠2-5g、氯化钾3-7g、氯化钙0.5-1.5g、氯化镁0.1-0.4g和黄芪多糖0.01-0.1g。7.根据权利要求1-6任一项所述的马属动物胚胎切割操作液，其特征在于，所述乳酸钠混合液中各组分的含量为：每1000ml混合液中含有乳酸钠5.4g、氯化钠3.2g、氯化钾4.6g、氯化钙1.1g、氯化镁0.32g和黄芪多糖0.08g。8.一种如权利要求1-7任一项所述的马属动物胚胎切割操作液的配制方法，其特征在于，所述配制方法包括：（1）按照各组分的含量称取乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙和氯化镁，并加入蒸馏水混合，置于37℃的恒温箱中0.5-6小时后，备用；（2）称取黄芪多糖放入无菌烧杯中，向无菌烧杯中加入步骤（1）中得到的混合液，搅拌使黄芪多糖充分溶解，得到乳酸钠混合液；（3）胚胎切割操作前，按照组分含量向乳酸钠混合液中加入青霉素、链霉素以及牛血清白蛋白、犊牛血清和灭活马血清中的一种或两种或三种，即可得到胚胎切割操作液。9.一种如权利要求1-8任一项所述的马属动物胚胎切割操作液的应用，其特征在于，所述胚胎切割操作液适用于马、牛、驴的非手术法胚胎移植技术。2CN103756956A说明书1/4页一种马属动物胚胎切割操作液配制方法和应用技术领域[0001]本发明属于动物胚胎移植领域，特别是涉及一种马属动物胚胎切割操作液及其配制方法和应用。背景技术[0002]胚胎分割技术（Embryobisection）是借助显微操作技术或徒手操作方法切割早期胚胎成二、四等多等份再移植给受体母畜，从而获得同卵双胎或多胎的生物学新技术。来自同一胚胎的后代有相同的遗传物质，因此胚胎分割可看成动物无性繁殖或克隆的方法之一。[0003]胚胎分割操作液是用于获取胚胎后进行胚胎分割操作时营养保护性液体。胚胎分割