一种马属动物卵母细胞体外培养液.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103805558103805558A(43)申请公布日2014.05.21(21)申请号201310645076.5(22)申请日2013.12.05(71)申请人青岛德瑞骏发生物科技有限公司地址266200山东省青岛市即墨市文化路５７号申请人伊犁德瑞骏发生物科技有限公司青岛德瑞鳌蓝马术有限公司(72)发明人张建军董斌刘海兵(51)Int.Cl.C12N5/075(2010.01)权利要求书1页权利要求书1页说明书4页说明书4页(54)发明名称一种马属动物卵母细胞体外培养液(57)摘要本发明公开了一种马属动物卵母细胞体外培养液，其中，培养液包括乳酸钠混合液、青霉素、链霉素，以及牛血清白蛋白、犊牛血清和灭活马血清中的一种、两种或三种；其配制方法包括：将乳酸钠混合液置于37℃的恒温箱中0.5-6小时后，备用，按照组分含量向乳酸钠混合液中加入青霉素、链霉素以及牛血清白蛋白、犊牛血清和灭活马血清中的一种或两种或三种，即得到培养液。适用于马、牛、驴的非手术法胚胎移植技术。本发明的有益效果是：具有取材方便、价格低廉、配制简单、使用方便等优点，非常适用于马属动物非手术法胚胎移植的规模化生产，有利于胚胎移植技术的推广应用。CN103805558ACN10385ACN103805558A权利要求书1/1页1.马属动物卵母细胞体外培养液，其特征在于，所述培养液包括乳酸钠混合液、青霉素、链霉素，以及牛血清白蛋白、犊牛血清和灭活马血清中的一种、两种或三种。2.根据权利要求1所述的马属动物卵母细胞体外培养液，其特征在于，所述乳酸钠混合液包括乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁和黄芪多糖中的一种或多种。3.根据权利要求1或2所述的马属动物卵母细胞体外培养液，其特征在于，所述培养液中各组分的含量为：每1000ml乳酸钠混合液中含有青霉素30-180万单位、链霉素20-200万单位，以及牛血清白蛋白0.05%-1.5%、犊牛血清0.5%-15%和/或灭活马血清0.5%-14%。4.根据权利要求1或2所述的马属动物卵母细胞体外培养液，其特征在于，所述培养液中各组分的含量为：每1000ml乳酸钠混合液中含有青霉素50-150万单位、链霉素50-150万单位，以及牛血清白蛋白0.1%-0.9%、犊牛血清1%-10%和/或灭活马血清1%-10%。5.根据权利要求1-4任一项所述的马属动物卵母细胞体外培养液，其特征在于，所述乳酸钠混合液中各组分的含量为：每1000ml混合液中含有乳酸钠1-7g、氯化钠1-5g、氯化钾2-7g、氯化钙0.5-2g、氯化镁0.05-0.5g和黄芪多糖0.01-0.3g。6.根据权利要求1-5任一项所述的马属动物卵母细胞体外培养液，其特征在于，所述乳酸钠混合液中各组分的含量为：每1000ml混合液中含有乳酸钠3-7g、氯化钠2-5g、氯化钾3-7g、氯化钙0.5-1.5g、氯化镁0.1-0.4g和黄芪多糖0.01-0.1g。7.根据权利要求1-6任一项所述的马属动物卵母细胞体外培养液，其特征在于，所述乳酸钠混合液中各组分的含量为：每1000ml混合液中含有乳酸钠5.4g、氯化钠3.2g、氯化钾4.6g、氯化钙1.1g、氯化镁0.32g和黄芪多糖0.08g。8.一种如权利要求1-7任一项所述的马属动物卵母细胞体外培养液的配制方法，其特征在于，所述配制方法包括：（1）按照各组分的含量称取乳酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙和氯化镁，并加入蒸馏水混合，置于37℃的恒温箱中0.5-6小时后，备用；（2）称取黄芪多糖放入无菌烧杯中，向无菌烧杯中加入步骤（1）中得到的混合液，搅拌使黄芪多糖充分溶解，得到乳酸钠混合液；（3）准备冲卵前，按照组分含量向乳酸钠混合液中加入青霉素、链霉素以及牛血清白蛋白、犊牛血清和灭活马血清中的一种或两种或三种，即可得到培养液。9.一种如权利要求1-8任一项所述的马属动物卵母细胞体外培养液的应用，其特征在于，所述培养液适用于马、牛、驴的非手术法胚胎移植技术。2CN103805558A说明书1/4页一种马属动物卵母细胞体外培养液技术领域[0001]本发明属于动物胚胎移植领域，特别是涉及一种马属动物卵母细胞体外培养液。背景技术[0002]胚胎移植又称受精卵移植，俗称人工授胎或借腹怀胎，是指将雌性动物的早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。胚胎移植的基本程序包括供体超排与授精、受体同期发情处理、采卵、检卵和移植。[0003]采卵又称胚胎回收，是指从供体收集胚胎的方法，分为手术法和非手术法两种。非手术法比手术法简单易行，而且对生殖器官的伤害程度较小，因此在生产中多采用此法。培养液是采卵过程中，用