一种竹子组培外植体获取方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102972176A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102972176A(43)申请公布日2013.03.20(21)申请号201210496921.2(22)申请日2012.11.29(71)申请人广西壮族自治区林业科学研究院地址530002广西壮族自治区南宁市西乡塘区邕武路23号(72)发明人郝海坤黄大勇黄开勇陈琴黄志玲李立杰徐振国(74)专利代理机构广西南宁汇博专利代理有限公司45114代理人邹超贤(51)Int.Cl.A01G1/00(2006.01)权利要求书权利要求书11页页说明书说明书33页页(54)发明名称一种竹子组培外植体获取方法(57)摘要本发明公开了一种竹子组培外植体的获取方法，包括选择经过测定的优良竹丛分蔸种植于容器中，8～10月把当年生的母竹于距离地面1.3～1.8m处截断，定期施肥、修剪，视情况断根控制生长，每年5～11月多次从母竹上剪取半木质化枝条，剪去叶子，修剪成茎段，使用洗洁精、自来水、酒精、升汞和无菌水清洗、消毒茎段，最后再次修剪茎段，获得用于竹子组织培养的无菌外植体。本发明可获取数量多、质量好、污染率低、丛芽萌发能力强的外植体，而且操作简单、方便，生产成本低，适用于青皮竹、粉担竹和花吊丝竹的工厂化育苗，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。CN102976ACN102972176A权利要求书1/1页1.一种竹子组培外植体获取方法，通过在苗圃营建采穗圃，目标化、精细化管理采穗母竹，控制枝条选择范围，以获取优良的竹子组培外植体，其获取方法包括母竹种植、母竹管理、枝条选择和修剪、茎段消毒和修剪等工序，其具体步骤如下：（1）母竹种植：于2～3月选择经过测定的优良竹丛分蔸种植于装有基质的容器中；（2）母竹管理：定期施肥、修剪，视情况断根控；（3）枝条选择和修剪：从母竹上剪取半木质化枝条，剪去叶子，修剪成茎段；（4）茎段消毒和修剪：先后使用洗洁精、自来水、酒精、升汞和无菌水清洗、消毒茎段，最后再次修剪茎段，获取组培外植体。2.根椐权利要求1所述的一种竹子组培外植体获取方法，其特征在于：所述的母竹种植方法是容器规格为口径50～80cm，高50～60cm，基质成分是表土10份、木糠3～5份、腐熟有机肥1～2份，种植株行距为0.7～1m×0.7～1.3m。3.根椐权利要求1所述的一种竹子组培外植体获取方法，其特征在于：所述的母竹管理方法是8～10月把当年生的母竹于距离地面1.3～1.8m处截断，分别于3～4月和6～7月给每丛母竹埋施100～200g复合肥，6～8月和翌年2～3月剪除母竹上的老枝条，当新笋生长过于旺盛时，于2～3月沿容器四周松土断根1次。4.根椐权利要求1所述的一种竹子组培外植体获取方法，其特征在于：所述的枝条选择方法是每年5～11月多次剪取枝条，选择直径0.1～0.4cm、具有3～6个节的枝条；茎段修剪方法是每3个节剪作一个茎段，剪口分别距离两端节0.1～0.3cm，剥除两端节的竹箨，保留中间节的竹箨。5.根椐权利要求1所述的一种竹子组培外植体获取方法，其特征在于：所述的茎段消毒方法是将茎段置于容器中，先用0.2～0.5%的洗洁精溶液浸泡10～20min，用纱布反复擦拭茎段外表，用自来水冲洗15～30min，再用75～80%酒精溶液浸泡茎段15～20min，用无菌水清洗干净，最后用0.1～0.15%升汞溶液浸泡茎段8～15min，用无菌水清洗干净。6.根椐权利要求1所述的一种竹子组培外植体获取方法，其特征在于：所述的茎段修剪方法是在超净工作台上，先把茎段两端剪除，只保留长度为1.5～3.0cm的中间带节芽部分，然后剥除竹箨。2CN102972176A说明书1/3页一种竹子组培外植体获取方法技术领域[0001]本发明属于植物无性繁殖技术领域，涉及一种竹子栽培外植体的获取方法。背景技术[0002]竹类植物是我国森林资源的重要组成部分，具有生长快、成材早、产量高、用途广等特点，同时具有良好的水源涵养和水土保持功能，是经济效益和生态效益具佳的植物。竹类植物很少开花，不易结实，所以基本不用种子育苗，而是采用无性繁殖的方法繁殖小苗。种子育苗主要有扦插繁殖和组织培养等方法。但是，扦插繁殖由于母竹利用率低，对原有竹林资源破坏较大，繁殖率低等缺陷，很难大批量生产育苗；而组培繁育对繁殖材料利用率高，对母竹成长影响极小，繁殖系数高，苗木整齐，可实现工厂化育苗，能满足种子生产的需要。[0003]目前，几种主要竹子已成功利用组织培养快繁技术进行育苗和造林，所使用的外植体种类有种胚、节芽、枝条茎段等，其中枝条茎段是利用最多的外植体材料。获取优良的外植体，是竹子组织培养成功的基础。但是，直接从现有的老竹丛中采集枝条，存在操作不便、枝条质量参差不齐、枝条利用率低、灭菌