一种枯草芽孢杆菌9A及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN103114055A*(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103114055103114055A(43)申请公布日2013.05.22(21)申请号201310020944.0C12R1/125(2006.01)(22)申请日2013.01.21(83)生物保藏信息CCTCCNo.M20124932012.12.03(71)申请人广西壮族自治区农业科学院植物保护研究所地址530007广西壮族自治区南宁市西乡塘区大学东路174号(72)发明人莫贱友潘朝勃李其利郭堂勋黄穗萍(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人王朋飞张庆敏(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)A01N63/02(2006.01)A01P3/00(2006.01)权权利要求书1页利要求书1页说明书5页说明书5页附图4页附图4页(54)发明名称一种枯草芽孢杆菌9A及其应用(57)摘要本发明涉及一种枯草芽孢杆菌9A及其应用。所述枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）9A，其保藏号为CCTCCNo.M2012493，并提供了所述枯草芽孢杆菌9A菌剂的制备方法。本发明的枯草芽孢杆菌9A及其菌剂对杧果炭疽病病菌生长有抑制作用，对其分生孢子有强烈的抑制作用甚至致死作用，在施用对象表面能形成一层保护膜阻止该病菌侵入，有效减少杧果炭疽病的发生，并且对杧果无药害，对环境无污染，具有良好的生物农药开发前景。CN103114055ACN10345ACN103114055A权利要求书1/1页1.一种枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）9A，其保藏号为CCTCCNo.M2012493。2.含有权利要求1所述枯草芽孢杆菌9A的菌剂。3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂的活菌数为109cfu/ml。4.权利要求2或3所述菌剂的制备方法，包括以下步骤：（1）菌株活化：将枯草芽孢杆菌9A接种于固体培养基上，于25℃-28℃下培养1-2天；（2）发酵种子培养：将上述活化菌株接种于液体培养基中，于25℃-28℃下振荡培养12-24小时，制得种子液；（3）菌剂发酵：将上述种子液接种到菌剂发酵培养液中，25℃-28℃下振荡培养48-72小时，制得枯草芽孢杆菌9A的菌剂。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述固体培养基为：牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，NaCl5.0g，蒸馏水1000mL，琼脂粉15g，pH7.0-7.2。6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中所述种子培养的液体培养基为：牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，NaCl5.0g，蒸馏水1000mL，pH7.0-7.2。7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述菌剂发酵培养液配方为：南瓜汁1000mL，葡萄糖10g，蛋白胨10g。8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中种子液的接种量为0.05-0.1%。9.权利要求1所述枯草芽孢杆菌9A、权利要求2或3所述菌剂在防治植物炭疽病中的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述植物炭疽病为杧果炭疽病。2CN103114055A说明书1/5页一种枯草芽孢杆菌9A及其应用技术领域[0001]本发明涉及农业微生物技术领域，具体地涉及一种枯草芽孢杆菌9A及其应用。背景技术[0002]胶孢炭疽菌（Colletotrichumgloeosporioides）引起的杧果炭疽病是杧果生产上的主要病害之一，在世界上各杧果产区均有发生。[0003]该病菌能侵染杧果的叶梢、花穗及果实,引起梢枯、叶斑、落叶、落花和落果等，并且该菌具有潜伏侵染特性，在采后贮运期可引起果皮出现黑斑块及果实腐烂，大大缩短商品杧果的货架期。[0004]目前该病主要采用化学药剂来防治，但长期使用化学农药会使病原菌产生抗药性，并带来污染环境和农药残留的安全问题，因此，开发和利用自然界存在的生防菌具有重要的实践意义。细菌在地球分布广泛，种类繁多，资源丰富，利用拮抗细菌作为作物病害防治材料具有明显的资源优势。发明内容[0005]本发明的目的是提供一株可用于防治杧果炭疽病的枯草芽孢杆菌及菌剂。[0006]本发明又一目的是提供上述枯草芽孢杆菌及其菌剂在防治植物炭疽病的应用。[0007]本发明的枯草芽孢杆菌9A（Bacillussubtilis）已于2012年12月3号保藏于中国典型培养物保藏中心（简称CCTCC；地址：中国.武汉.武汉大学；邮编：430072），保藏编号CCTCCNo.M2012493。[0008]本发明提供的枯草芽孢杆菌9A菌剂的活菌数为109cfu/ml。优选3-8×109cfu/ml。[0009]所述