甘蓝型油菜及其亲本物种甘蓝和白菜MAPK1基因家族及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN103468713A*(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103468713103468713A(43)申请公布日2013.12.25(21)申请号201310389076.3(22)申请日2013.08.31(71)申请人西南大学地址400715重庆市北碚区天生路2号(72)发明人梁颖柴友荣卢坤陆俊杏李加纳陆奇丰张凯曲存民(74)专利代理机构北京同恒源知识产权代理有限公司11275代理人赵荣之(51)Int.Cl.C12N15/29(2006.01)C12N15/82(2006.01)C12N1/21(2006.01)权利要求书1页权利要求书1页说明书11页说明书11页序列表6页序列表6页附图7页附图7页(54)发明名称甘蓝型油菜及其亲本物种甘蓝和白菜MAPK1基因家族及其应用(57)摘要本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及甘蓝型油菜及其亲本物种甘蓝和白菜MAPK1基因家族及其应用；所述包括甘蓝MAPK1基因和白菜MAPK1基因，所述甘蓝型油菜MAPK1基因家族包括2个成员：BnMAPK1-1基因和BnMAPK1-2基因；芸薹属4个MAPK1基因之间具有较高的同源性；本发明还公开了上述基因家族在植物分子育种中的应用，通过构建正义超量表达植物载体，转化甘蓝型油菜品种中油821后，获得12株转基因植株。与非转基因的外植体对照相比，转基因植株生长发育加快，植株粗壮，同时抗性提高，是油菜品种改良的新资源。CN103468713ACN1034687ACN103468713A权利要求书1/1页1.甘蓝型油菜及其亲本物种甘蓝和白菜MAPK1基因家族，其特征在于：所述甘蓝MAPK1基因全长cDNA序列如SEQIDNo.1所示；所述白菜MAPK1基因全长cDNA序列如SEQIDNo.3所示；所述甘蓝型油菜MAPK1基因家族包括2个成员：BnMAPK1-1基因和BnMAPK1-2基因；所述BnMAPK1-1全长cDNA序列如SEQIDNo.5所示；所述BnMAPK1-2全长cDNA序列如SEQIDNo.7所示。2.根据权利要求1所述的甘蓝型油菜及其亲本物种甘蓝和白菜MAPK1基因家族，其特征在于：所述甘蓝MAPK1的基因组DNA序列如SEQIDNo.2所示；所述白菜MAPK1的基因组DNA序列如SEQIDNo.4所示；所述BnMAPK1-1的基因组DNA序列如SEQIDNo.6所示，所述BnMAPK1-2的基因组DNA序列如SEQIDNo.8所示。3.含有权利要求1或2所述甘蓝型油菜及其亲本物种甘蓝和白菜MAPK1基因家族中任一种或多种基因或基因截短片段的重组表达载体。4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体为含有正义超量表达片段的正义超量植物表达载体，所述正义超量表达片段的核苷酸序列与SEQIDNo.5的1-1620bp一致。5.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于：所述正义超量植物表达载体是将正义超量表达片段插入pC2301M1B1载体的35S启动子和NOS终止子之间而得到。6.含有权利要求3或4或5所述重组表达载体的微生物转化体。7.权利要求1或2所述甘蓝型油菜及其亲本物种甘蓝和白菜MAPK1基因家族在植物品种改良和抗性育种中的应用。2CN103468713A说明书1/11页甘蓝型油菜及其亲本物种甘蓝和白菜MAPK1基因家族及其应用技术领域[0001]本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及甘蓝型油菜(Brassicanapus)及其亲本物种甘蓝(Brassicaoleracea)和白菜(Brassicarapa)MAPK1基因家族及其应用。背景技术[0002]芸薹属（Brassica）是芸薹科（Brassicacease）最重要的一个属，含有世界性的重要蔬菜、油料和观赏作物，如白菜（B.rapa）、甘蓝（B.oleracea）和甘蓝型油菜（B.napus），而且甘蓝型油菜是由白菜和甘蓝通过天然种间杂交并加倍而形成的异源四倍体。拟南芥（Arabidopsisthaliana）则是来自芸薹科的研究最深入的模式植物。染色体分子标记共线性研究发现，芸薹属植物之间以及芸薹属与拟南芥之间均存在基因组水平和基因水平的保守性。同为芸薹科的模式植物拟南芥功能基因组学的研究成果，为推动芸薹属植物重要性状的分子机理研究和比较基因组学研究提供了重要参考。[0003]蛋白质磷酸化和去磷酸化是调控细胞响应各种外源信号的重要机制，MAPKs(促分裂原活化蛋白激酶)级联途径在内源、外源信号传导过程中发挥着重要的作用。植物中的MAPK通路是多种生长信号跨膜传递的共同通路，它可以将外源刺激转入细胞内并引发细胞应答，从而调控基因表达、细胞生长发育、细胞分裂分化以及凋亡等过程，