一种基于稳定同位素比值鉴别冬虫夏草产地的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103645238103645238A(43)申请公布日2014.03.19(21)申请号201310668819.0(22)申请日2013.12.11(71)申请人中国食品发酵工业研究院地址100015北京市朝阳区酒仙桥中路24号院6号楼申请人玉树藏族自治州三江源药业有限公司(72)发明人程池扎西才吉李辉姚粟刘洋白飞荣钟其顶(51)Int.Cl.G01N27/62(2006.01)权权利要求书1页利要求书1页说明书3页说明书3页附图1页附图1页(54)发明名称一种基于稳定同位素比值鉴别冬虫夏草产地的方法(57)摘要本发明公开了一种基于稳定同位素比值鉴别冬虫夏草产地的方法，属冬虫夏草真实性鉴别技术领域。主要步骤如下：（1）采用稳定同位素质谱技术测定真实产地冬虫夏草样品的δ15N值，构建真实产地冬虫夏草样品δ15N数据库；（2）测定待测冬虫夏草样品的δ15N值；（3）将待测样品的δ15N值与数据库中真实产地冬虫夏草样品δ15N值进行显著性差异分析，若无显著差异这表明待测样品与真实样品来自于同一产地，反之则表明来自不同的产地。本发明利用稳定同位素质谱技术建立了一种能够准确鉴别冬虫夏草产地的方法，解决我国冬虫夏草产地的市场监管存在的技术难题，利于规范市场行为，保护消费者和企业的合法权益，促进冬虫夏草产业的健康有序发展。CN103645238ACN10364528ACN103645238A权利要求书1/1页1.一种基于氮稳定同位素比值鉴别冬虫夏草产地的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：测定待测冬虫夏草样品的δ15N值；将待测样品的δ15N值在真实产地冬虫夏草样品δ15N值数据库中进行显著性差异分析，若无显著差异则表明待测样品与真实样品来自于同一产地，反之则表明来自不同的产地。2.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其特征在于，采用稳定同位素质谱技术测定冬虫夏草样品的δ15N值。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，测定样品δ15N值前，利用组织粉碎仪将冬虫夏草样品粉碎成细微粉末。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，组织粉碎仪的粉碎条件为1600rpm，5min。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，粉碎后的冬虫夏草样品采用FlashEA1112型元素分析仪转化为纯净N2气体后经稀释仪进入同位素质谱仪进行测定。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在将样品转化为纯净N2气体过程中，元素分析仪工作参数为：进样器氦气吹扫流量为200ml·min-1，氧化炉温度为1020℃，还原炉温度为650℃，载气氦气流量为90ml·min-1。2CN103645238A说明书1/3页一种基于稳定同位素比值鉴别冬虫夏草产地的方法技术领域[0001]本发明属于药材鉴别领域，具体涉及一种冬虫夏草的产地鉴别方法。背景技术[0002]冬虫夏草是我国青藏高原地区的珍稀物种资源，具有提高人体免疫力、抗肿瘤等保健功能和特殊药效，其有效作用在民间已得到广泛的认可。[0003]冬虫夏草的产地属性是衡量其价值的重要指标，不同产地的冬虫夏草在营养成分和功能上具有明显差别，价值上也存在差异。然而我国尚缺乏冬虫夏草产地有效鉴别的技术手段和方法，仅仅依靠企业自律和现有的标准管理体系无法有效规范市场，极少部分企业受到利益驱动，利用假冒伪劣冬虫夏草冒充优质产地冬虫夏草，获取高额利润，对冬虫夏草市场造成较大冲击，不利于我国冬虫夏草产业的良性发展和有序竞争，同时损害了消费者的利益和知情权。因此开发一种能够有效鉴别冬虫夏草产地的技术方法对于规范市场行为，促进我国冬虫夏草产业健康发展，维护合法企业和消费者利益具有十分重要的现实意义。发明内容[0004]本发明的目的是提供一种用于冬虫夏草原冬虫夏草产地鉴别的可靠方法。[0005]为达到上述目的，本发明的发明人经过多年研究发现，不同地区的冬虫夏草在形成过程中，不断与外界环境进行物质交换，从冬虫夏草侵染幼虫到菌丝长满幼虫虫体的整个过程中，虫草处于土壤下，其体内物质组成受当地土壤影响较大，待虫草长出子座后与空气直接接触，受到当地空气、雨水等其他环境因素的影响，冬虫夏草体内同位素（如N）受土壤、空气、气候条件等因素影响而发生自然分馏效应，导致不同产地冬虫夏草体内同位素自然丰度的差异；成熟冬虫夏草的同位素丰度在一定程度上能够反映所处环境的同位素特征。因此利用稳定同位素比值质谱检测冬虫夏草中氮稳定同位素的比值差异可鉴别不同产地的冬虫夏草。[0006]本发明采用稳定同位素比值质谱仪对来自真实产地的冬虫夏草中氮同位素比值进行了测定，通过对待测冬虫夏草样品进行氮稳定同位素比值测定，然后将待测样品氮稳定同位素比值与参考的真实产地冬虫夏草氮稳定同