水稻抗褐飞虱基因Bph9及其分子标记和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103667309103667309A(43)申请公布日2014.03.26(21)申请号201210326386.6C12N15/82(2006.01)(22)申请日2012.09.05C12N15/84(2006.01)A01H5/00(2006.01)(71)申请人武汉大学C12N15/11(2006.01)地址430072湖北省武汉市武汉大学生命科学学院(72)发明人何光存陈荣智王洋荆胜利祝莉莉杜波(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人王朋飞张庆敏(51)Int.Cl.C12N15/29(2006.01)C07K14/415(2006.01)C12N15/63(2006.01)C12N1/21(2006.01)C12N5/10(2006.01)权利要求书3页权利要求书3页说明书23页说明书23页C12Q1/68(2006.01)序列表15页序列表15页附图8页附图8页(54)发明名称水稻抗褐飞虱基因Bph9及其分子标记和应用(57)摘要本发明提供了水稻抗褐飞虱基因Bph9及其分子标记和应用。其具有SEQIDNo.1所示的核苷酸序列，其cDNA序列如SEQIDNo.2所示。Bph9基因定位于分子标记InD2和RM28466之间。与该基因紧密连锁的分子标记还有RM28438、InD28450、InD28453、InD14、InD28432、RM28481和RM28486之一，可用于筛选含有抗褐飞虱基因Bph9的水稻。Bph9基因属于NBS-LRR基因家族，编码的蛋白质与植物抗病性相关，通过遗传转化和杂交，将Bph9基因转入普通水稻品种，能够提高水稻对褐飞虱的抗性，从而减轻褐飞虱产生的危害，达到增产和稳产的目的。CN103667309ACN103679ACN103667309A权利要求书1/3页1.一种分离的多核苷酸，其具有水稻抗褐飞虱基因Bph9序列，所述序列是SEQIDNO.1所示的核苷酸序列，或该序列经替换、缺失或增加一个或多个核苷酸，且编码相同或相似，且具有相同功能的氨基酸序列的核苷酸序列。2.一种分离的多核苷酸，其具有水稻抗褐飞虱基因Bph9的cDNA序列，所述序列是SEQIDNO.2所示的核苷酸序列，或该序列经替换、缺失或增加一个或多个核苷酸，且编码相同或相似，且具有相同功能的氨基酸序列的核苷酸序列。3.如权利要求2所述的多核苷酸，其cDNA序列如SEQIDNO.2所示。4.权利要求1~3任一所述的多核苷酸编码的蛋白。5.如权利要求4所述的蛋白，其具有SEQIDNO.3所示的氨基酸序列。6.含有权利要求1~3所述多核苷酸的载体。7.含有权利要求6所述载体的宿主。8.权利要求1~3任一所述多核苷酸在水稻选育中的应用。9.权利要求1~3任一所述多核苷酸在提高水稻抗褐飞虱抗性中的应用。10.权利要求1~3任一所述多核苷酸在制备转基因抗褐飞虱水稻中的应用。11.水稻抗褐飞虱基因Bph9的分子标记，其可由下述之一的引物对经PCR扩增获得：1）标记引物，RM28438标记引物：正向引物序列GTTCGTGAGCCACAACAAATCC反向引物序列GTTAAATGCTCCACCAAACACACC2）标记引物，InD28450标记引物：正向引物序列GGTTGGAAAAGAAGCGATCA反向引物序列GCATCRTAAGGTTGCCATCA3）标记引物，InD28453标记引物：正向引物序列GGCAAAGACAAGCCATAAGC反向引物序列ATCCATCAGCAATGACACGA4）标记引物，InD28432标记引物：正向引物序列TGCAGACACCACATGCATAA反向引物序列ACGCATACACACAGGGACAA5）标记引物，InD2标记引物：正向引物序列AACAGACACGTTGCGTCTTG反向引物序列CTTGCCGCTTAGAGGAGATG6）标记引物，InD14标记引物：正向引物序列CCACTCTGAAAATCCCAAGC反向引物序列ACCAGTTAAGTCACGCTCAAA7）标记引物，RM28466标记引物：正向引物序列CCGACGAAGAAGACGAGGAGTAGCC反向引物序列AGGCCGGAGAGCAATCATGTCG8）标记引物，RM28481标记引物：正向引物序列GTCAATTAACCATTGCCCATGC反向引物序列TTCACGTGGGAACTACTCATGC2CN103667309A权利要求书2/3页9）标记引物，RM28486标记引物：正向引物序列TTCTCTGAATGCCCTGTCTCTCC反向引物序列GGCAAATCAGAACAAGTCTCACC。12.如权利要求11