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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109943517A(43)申请公布日2019.06.28(21)申请号201811235713.0(22)申请日2018.10.23(30)优先权数据10-2017-01774922017.12.21KR(71)申请人车医科学大学校产学协力团地址韩国京畿道(72)发明人洪秀麟崔容秀(74)专利代理机构北京市中伦律师事务所11410代理人杨黎峰钟锦舜(51)Int.Cl.C12N5/00(2006.01)权利要求书2页说明书10页附图8页(54)发明名称一种用于细胞培养的载体,其制备方法及一种使用其的细胞培养的方法(57)摘要本发明提供一种用于细胞培养的载体,其制备方法及一种使用其的细胞培养的方法。据此,提高了细胞的粘附率,表面积和增殖率,以及促进了细胞分离而增加细胞回收率。此外,生物活性物质得以缓慢释放,降低了细胞培养的过程成本。CN109943517ACN109943517A权利要求书1/2页1.一种用于细胞培养的载体,其包括:二氧化硅纳米粒子,其包括开孔并含有生物活性物质在内;以及固体载体,其与二氧化硅纳米粒子结合。2.如权利要求1所述的用于细胞培养的载体,其中:所述生物活性物质选自碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF),脑源性神经营养因子(brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF),血管内皮生长因子(vascularendothelialcellgrowthfactor,VEGF),白细胞介素(interleukin,IL)-4,IL-6,IL-2,表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF),干细胞因子(stemcellfactor,SCF),干扰素伽玛(interferongamma,IFNγ),以及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocytemacrophagecolony-stimulatingfactor,GM-CSF)。3.如权利要求1所述的细胞培养载体,其中:所述二氧化硅纳米粒子的开孔内部以具有正电荷,负电荷,或疏水性的官能团修饰,且所述生物活性物质与所述官能团结合。4.如权利要求1所述的用于细胞培养的载体,其中:所述生物活性物质从所述二氧化硅纳米粒子缓慢释放。5.如权利要求1所述的用于细胞培养的载体,其中:所述二氧化硅纳米粒子基于溴代十六烷基吡啶(cetylpyridiniumbromide,CPB),溴化十六烷基三甲铵(cetyltrimethylammoniumbromide,CTAB),或其组合。6.如权利要求1所述的用于细胞培养的载体,其中:所述二氧化硅纳米粒子以疏水相互作用结合所述固体载体。7.如权利要求1所述的用于细胞培养的载体,其中:所述固体载体是一颗微珠。8.如权利要求7所述的用于细胞培养的载体,其中:所微珠是聚苯乙烯微珠。9.如权利要求1所述的用于细胞培养的载体,其中:所述固体载体以胶原蛋白,纤维蛋白,纤连蛋白,玻璃体结合蛋白,基质胶,明胶,层粘连蛋白,肝素,多聚赖氨酸,细胞外基质,或其组合作涂布。10.如权利要求1所述的用于细胞培养的载体,其中:所述固体载体上的二氧化硅纳米粒子的密度是大约1000颗/mm2至大约500000颗/mm2。11.如权利要求1所述的用于细胞培养的载体,其中:所述用于细胞培养的载体是灭菌的。12.一种制备用于细胞培养的载体的方法,其包括以下步骤:将包括硅前体,极性溶剂,非极性溶剂,离子型表面活性剂以及碱性化合物的溶液放入压力容器进行水热处理以制备二氧化硅纳米粒子;培养所述二氧化硅纳米粒子及生物活性物质,将所述生物活性物质结合在所述二氧化硅纳米粒子的开孔的内部;以及将结合了所述生物活性物质的二氧化硅纳米粒子结合在固体载体。13.如权利要求12所述的制备用于细胞培养的载体的方法,所述方法还包括:将结合了所述二氧化硅纳米粒子的固体载体灭菌。2CN109943517A权利要求书2/2页14.如权利要求12所述的制备用于细胞培养的载体的方法,其中:所述硅前体选自硅酸甲酯,四乙氧基硅烷,四丙氧基硅烷以及其混合物,所述极性溶剂选自水,乙醇以及其混合物,所述非极性溶剂选自己烷,环己烷,甲基环己烷,甲苯,庚烷,辛烷,以及其混合物。15.如权利要求12所述的制备用于细胞培养的载体的方法,其中:所述离子型表面活性剂选自氯化十六烷吡啶,溴代十六烷基吡啶,氯化十六烷基三甲基铵,溴化十六烷基三甲铵,以及其混合物,所述碱性化合物选自氨水溶液,尿素以及其混合物。16.一种细胞培养的方法,其包括:在权利要求1的用于细胞培养的载体的存在下培养细胞。3CN109943517A说明书1/10页一种用于细胞培养