一种用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110045051A(43)申请公布日2019.07.23(21)申请号201910331594.7(22)申请日2019.04.24(71)申请人山东省食品药品检验研究院地址250101山东省济南市高新区新泺大街2749号药品检验大楼1-101(72)发明人赵发董瑞于文江刘艳明张喜琦张寒霜韩晓晓(74)专利代理机构北京元本知识产权代理事务所11308代理人岳秀梅(51)Int.Cl.G01N30/88(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/72(2006.01)G01N30/74(2006.01)权利要求书1页说明书9页附图2页(54)发明名称一种用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法及其应用(57)摘要本发明公开了一种用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法及其应用，该方法包括以下步骤：(1)将蛋白酶溶解于稀盐酸中，得到提取液；(2)除去水产动物的骨骼和内脏，将剩余的组织匀浆；(3)称取匀浆后的样品，加入提取液，涡旋、超声，将超声后的样品提取物置于恒温培养箱中37℃过夜，将样品提取物8000rpm离心，得到样品提取上清液；(4)将样品提取上清液用0.22μm的滤膜过滤，得到样品提取溶液，用于后续砷形态检测。以酶解提取方式处理水产动物样品，实现高效提取，同时保证前处理过程中各种砷形态不发生转化或损失，避免了基质干扰，提高了各种砷形态的回收率，确保砷形态测定的准确性。CN110045051ACN110045051A权利要求书1/1页1.一种用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将蛋白酶溶解于稀盐酸中，得到提取液；(2)除去水产动物的骨骼和内脏，将剩余的组织匀浆；(3)称取匀浆后的样品，加入提取液，涡旋、超声，将超声后的样品提取物置于恒温培养箱中37℃过夜，将样品提取物8000rpm离心，得到样品提取上清液；(4)将样品提取上清液用0.22μm的滤膜过滤，得到样品提取溶液，用于后续砷形态检测。2.根据权利要求1所述的用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法，其特征在于，所述蛋白酶包括pepsin、trypsin或protease。3.根据权利要求2所述的用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法，其特征在于，所述蛋白酶为protease。4.根据权利要求1所述的用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法，其特征在于，步骤(1)为：称取4㎎蛋白酶溶解于0.75mL0.5％HCl，得到提取液。5.根据权利要求4所述的用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法，其特征在于，步骤(3)为：称取匀浆后的样品0.5g于15mL的塑料离心管中，加入0.75mL提取液，用超纯水将样品定容至5mL，涡旋、超声15min，将超声后的样品提取物置于恒温培养箱中37℃过夜，将样品提取物8000rpm离心，得到提取样品上清液。6.根据权利要求1所述的用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法，其特征在于，还包括以下步骤：称取匀浆后的样品，加入提取液，并加入不同浓度梯度的标准工作溶液，涡旋、超声，将超声后的样品加标提取物置于恒温培养箱中37℃过夜，将样品加标提取物8000rpm离心，得到样品加标上清液；将样品加标上清液用0.22μm的滤膜过滤，得到样品加标溶液，用于后续砷形态检测。7.一种如权利要求1-6任一项所述的用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法的应用，其特征在于，用于液相色谱-原子荧光光谱法或液相色谱-电感耦合等离子质谱法检测砷形态。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，使用液相色谱-电感耦合等离子质谱法同时检测11种砷形态，所述11种砷形态包括砷甜菜碱、二甲基砷、亚砷酸、砷胆碱、一甲基砷、砷酸、4-硝基苯基胂酸、洛克沙砷、阿散酸、卡巴胂和对羟基苯胂酸。9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，使用液相色谱-原子荧光光度计同时检测二甲基砷、一甲基砷、亚砷酸砷酸。2CN110045051A说明书1/9页一种用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法及其应用技术领域[0001]本发明涉及元素形态分析领域，尤其涉及一种用于水产品中砷形态检测的样品前处理方法及其应用。背景技术[0002]近几十年来，随着城市化建设和工业化的快速发展，带来越来越多的的化学污染，严重影响了我们周围的环境，破坏了生态系统。元素污染是环境污染的一种，其中重金属砷带来的污染引起越来越多学者的关注，砷有很多种形态，可以分为无机砷和有机砷，无机砷主要是三价砷和五价砷，有机砷有很多种如：砷甜菜碱、二甲基砷、砷胆碱、一甲基砷、阿散酸、卡巴砷、硝苯砷酸、4-羟基苯砷酸、洛克沙砷等。砷的生物毒性和砷的形态有关，砷的毒性由于形态的不同，毒性相差几个数量级，无机砷的毒性较强，具有