一种从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111662348A(43)申请公布日2020.09.15(21)申请号202010526073.X(22)申请日2020.06.11(71)申请人湖南甜蔓生物科技有限公司地址425000湖南省永州市东安县经济开发区白牙市工业园(72)发明人张宝堂蒋乐文(74)专利代理机构长沙智路知识产权代理事务所(普通合伙)43244代理人曲超(51)Int.Cl.C07H17/04(2006.01)C07H1/08(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一种从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法(57)摘要本发明公开的一种从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法，包括以下步骤：1)将芍药药材经液氮低温粉碎、过筛，得到芍药粉末；2)将芍药粉末进行高压脉冲电场和酶解提取得到目标提取液；3)用超滤膜滤过,取超滤液；4)将超滤液用极性大孔树脂柱脱色；5)脱色液用层析树脂进行吸附，梯度洗脱，分部收集洗脱液，选择性合并洗脱液中含有芍药苷的流份以及含有芍药内酯苷流份，分别浓缩、干燥，得到芍药苷或芍药内酯苷。本发明提供的提取方法可得到高纯度高收率的芍药苷或芍药内酯苷，且方法简单，耗能低，操作工艺条件易于控制，易于实现工业化生产。CN111662348ACN111662348A权利要求书1/1页1.一种从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：1)前处理：将芍药药材经液氮低温粉碎、过筛，得到芍药粉末；2)提取：将步骤1)所得芍药粉末与水混合，置于高压脉冲电场中在0～4℃条件下进行低温提取，过滤，得到初次提取液和滤渣，所述高压脉冲电场的强度为15～25kV/cm；在滤渣中加入水和纤维素酶，酶解，过滤，得到二次提取液，将初次提取液与二次提取液混合，减压浓缩，离心，得到目标提取液；3)超滤：将步骤2)所得目标提取液经超滤膜过滤，得到超滤液；4)脱色：将步骤3)所得超滤液用极性大孔树脂脱色，得到脱色液；5)纯化：将步骤4)所得脱色液用层析树脂进行吸附，然后梯度洗脱，分部收集洗脱液，选择性合并洗脱液中含有芍药苷的流份以及含有芍药内酯苷流份，分别浓缩、干燥，得到芍药苷或芍药内酯苷。2.根据权利要求1所述的从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法，其特征在于，步骤1)中，所述过筛的目数为80-100目。3.根据权利要求1所述的从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法，其特征在于，步骤2)中，高压脉冲电场提取时，先将所述芍药粉末置于高压脉冲电场中，然后通过蠕动泵按照70～90mL/min的速率将水加入至高压脉冲电场中与所述芍药粉末混匀，进行高压脉冲电场提取，提取时间为0.5～1.5h；芍药粉末与水的重量比为1：5～15。4.根据权利要求1所述的从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法，其特征在于，步骤2)中，酶解提取时，所述纤维素酶为低温纤维素酶，所述纤维素酶为低温纤维素酶，所述低温纤维素由γ-变形菌纲、硬壁菌门、放线菌门、拟杆菌门、以及β-变形菌纲类群中任意一种菌种表达得到，所述酶解的温度为10～20℃，pH4.5～6.5，所述纤维素酶的加入量为芍药粉末的0.01～0.03％，所述纤维素酶的酶活度不小于100000U/g；减压浓缩时，真空度为0.07MPa～0.09MPa，温度为50～65℃，时间为30～60min。5.根据权利要求1所述的从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法，其特征在于，步骤3)中，所述超滤膜的截留分子量为3～5万道尔顿；所述超滤膜的材料为纤维素及其衍生物、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚偏氟乙烯、聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺、聚砜酰胺、磺化聚砜、交链的聚乙烯醇、改性丙烯酸聚合物中的任一种。6.根据权利要求1所述的从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法，其特征在于，步骤3)中，操作压力为0.4～0.7MPa，温度为10～30℃；所述超滤膜过滤的方式为错流过滤。7.根据权利要求1所述的从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法，其特征在于，步骤4)中，流速为1～3bv/h；所述极性大孔树脂为ADS-7或XAD-761。8.根据权利要求1所述的从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法，其特征在于，步骤5)中，所述层析树脂为60～80目的HP-20SS或SP825。9.根据权利要求1所述的从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法，其特征在于，步骤5)中，所述梯度洗脱具体为：先用水洗至流出液无色且糖色反应为阴性，再依次用1％～10％、10％～20％、20％～30％、30％～40％乙醇水溶液进行梯度洗脱，洗脱流速为2～5bv/h。10.根据权利要求1所述的从芍药中提取芍药苷和芍药内酯苷的提取方法，其特征在于，步骤5)中，所述干燥为喷雾干燥或真空冷冻干燥