EpCAM单抗修饰的氧化石墨烯纳米粒肿瘤靶向基因递送载体系统.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115737566A(43)申请公布日2023.03.07(21)申请号202211220218.9A61P35/00(2006.01)(22)申请日2022.10.08A61P35/04(2006.01)(71)申请人首都医科大学地址100069北京市丰台区右安门外西头条10号(72)发明人崔纯莹张爽孙琪陈思(74)专利代理机构北京华科联合专利事务所(普通合伙)11130专利代理师王为(51)Int.Cl.A61K9/14(2006.01)A61K47/04(2006.01)A61K47/36(2006.01)A61K47/42(2017.01)A61K31/7088(2006.01)权利要求书1页说明书17页附图11页(54)发明名称EpCAM单抗修饰的氧化石墨烯纳米粒肿瘤靶向基因递送载体系统(57)摘要本发明公开了用于递送survivin‑siRNA的靶向基因药物递送系统GO‑CS/anti‑EpCAM/survivin‑siRNA(GCE/siRNA)，公开了靶向基因药物递送载体的制备方法及基因包载方法，公开了其纳米结构，公开了递送系统的细胞摄取情况，公开了其沉默survivin基因以及下调survivin蛋白表达的作用，公开了其抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡的作用以及其对细胞周期的影响，公开了其抑制肿瘤细胞迁移与侵袭的效率，并进一步公开了其对人乳腺癌MCF‑7移植瘤裸鼠肿瘤的靶向作用与生长抑制作用，且公开了其血液安全性、组织安全性相关指标。因此阐明了该靶向基因药物递送系统在肿瘤的基因药物治疗中的应用前景。CN115737566ACN115737566A权利要求书1/1页1.一种具有靶向性的抗肿瘤基因药物递送系统GCE/siRNA。2.权利要求1所述的具有靶向性的抗肿瘤基因药物递送系统，其特征在于，由靶向基因递送载体GCE和抗肿瘤基因治疗药物survivin‑siRNA制备而成。3.权利要求1所述的具有靶向性的抗肿瘤基因药物递送系统，其特征在于，GCE与survivin‑siRNA的质量比为20‑40:0.5‑2，优选为30:1。4.权利要求1所述的具有靶向性的抗肿瘤基因药物递送系统，其特征在于，靶向基因递送载体GCE由以下成分制成：GO、CS、anti‑EpCAM。5.权利要求1所述的具有靶向性的抗肿瘤基因药物递送系统，其特征在于，靶向基因递送载体GCE的制备方法为：氧化石墨烯在NaOH溶液中，与ClCH2COONa反应，得到羧基化的氧化石墨烯，再通过与壳聚糖进行酰胺化反应，得到GO‑CS，最后室温下与EpCAM单抗混合，得到GCE载体。6.权利要求1所述的具有靶向性的抗肿瘤基因药物递送系统，其特征在于，该基因递送系统为纳米结构。7.权利要求1所述的具有靶向性的抗肿瘤基因药物递送系统的制备方法，包括以下步骤：取基因递送载体GCE与抗肿瘤基因survivin‑siRNA按照质量比为30:1在常温下混合，室温静置，即得GCE/siRNA。8.权利要求1所述的具有靶向性的抗肿瘤基因药物递送系统的制备方法，其特征在于，GCE由以下方法制备而成：1)制备GO‑COOH称取GO于圆底烧瓶中，加入水，超声使其形成均匀分散的GO分散液，冰浴下，加入NaOH，再适当分散后，加入ClCH2COONa，超声反应，再使用磁力搅拌器室温搅拌，反应停止后，将反应液离心后弃上清，沉淀用水洗涤至中性，干燥，即得羧基化的氧化石墨烯GO‑COOH；2)制备GO‑CS称取GO‑COOH和CS溶于MES缓冲液中，超声使其均匀分散，称取EDC和NHS，缓缓加入上述混合液中，继续超声；然后，将反应液室温下磁力搅拌，反应停止后，将混合液离心后弃上清，用乙酸溶液多次洗涤沉淀物以除去未反应的CS，再用水洗涤至中性，干燥，即得产物GO‑CS；3)制备GCE称取GO‑CS，超声使其均匀分散于水中，加入anti‑EpCAM，室温搅拌过夜，反应停止后，将反应液离心，沉淀物用水洗涤，干燥，即得产物GCE。9.权利要求7所述的具有靶向性的抗肿瘤基因药物递送系统的制备方法，其特征在于，制备GCE/siRNA的步骤：称取GCE分散在DEPC水中，超声使其分散均匀，再将GCE与survivin‑siRNA混合，室温静置，即得GCE/siRNA。10.权利要求1所述的具有靶向性的抗肿瘤基因药物递送系统在制备抑制肿瘤的药物中的应用。2CN115737566A说明书1/17页EpCAM单抗修饰的氧化石墨烯纳米粒肿瘤靶向基因递送载体系统技术领域[0001]本发明属于生物医药学领域，涉及一种具有靶向性的抗肿瘤基因药物递送系统：GCE/siRNA。背景技术[0002]近年来，基因治疗已迅速发展为一项重要的医疗技术并逐渐被广泛接受