L-异亮氨酸的提取方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113277955A(43)申请公布日2021.08.20(21)申请号202110687130.7(22)申请日2021.06.21(71)申请人通辽梅花生物科技有限公司地址028024内蒙古自治区通辽市科尔沁区木里图工业园区通辽梅花生物科技有限公司(72)发明人吴涛王海雷陈钊高鹏李岩赵津津(74)专利代理机构深圳市威世博知识产权代理事务所(普通合伙)44280代理人刘彩霞(51)Int.Cl.C07C227/40(2006.01)C07C229/08(2006.01)权利要求书2页说明书7页附图1页(54)发明名称L-异亮氨酸的提取方法(57)摘要本发明公开了L‑异亮氨酸的提取方法，其包括如下步骤：(1)发酵液中菌体变性分离得到清液；(2)清液脱色；(3)清液脱色后一次蒸发结晶；(4)结晶液分离得到一次L‑异亮氨酸结晶晶体；(5)一次L‑异亮氨酸结晶晶体溶解二次脱色；(6)二次蒸发结晶制得食品级L‑异亮氨酸产品。本发明实现在不采用离子交换工艺和色谱工艺的情况下，食品级L‑异亮氨酸收率达到80％以上；总提取收率达95％以上；本发明工艺过程中无污水排放，也无其他复杂、高成本设备投入，运行成本低，有利于大规模工业化生产。CN113277955ACN113277955A权利要求书1/2页1.L‑异亮氨酸的提取方法，其特征在于，其包括如下步骤：(1)发酵液中菌体变性分离得到清液；(2)清液脱色；(3)清液脱色后一次蒸发结晶；(4)结晶液分离得到一次L‑异亮氨酸结晶晶体；(5)一次L‑异亮氨酸结晶晶体溶解二次脱色；(6)二次蒸发结晶制得食品级L‑异亮氨酸产品；其中，(1)发酵液中菌体变性分离得到清液：将发酵液放罐后调pH值至4‑6，使蛋白变性沉降，然后过陶瓷膜分离菌体，得到菌体截留液与清液；(2)清液脱色：将步骤(1)得到的清液进行活性炭脱色，每100L清液中加入0.5‑2kg的活性炭；(3)清液脱色后一次蒸发结晶：清液脱色后将pH值调至5‑7，加入结晶蒸发器中进行蒸发结晶；真空度0.085‑0.094Mpa，加晶种前搅拌转速20‑50转/min,加晶种后搅拌转速100‑200转/min，结晶蒸发器中L‑异亮氨酸含量为250‑300g/L放罐；(4)结晶液分离得到一次L‑异亮氨酸结晶晶体：结晶液放罐后不冷却直接分离，分离粗品的水分＜10％，得到一次L‑异亮氨酸结晶晶体；分离得到的一次母液与步骤(1)得到的菌体截留液混合后，浓缩至30‑50％干物喷浆造粒制得L‑异亮氨酸饲料；(5)一次L‑异亮氨酸结晶晶体溶解二次脱色：一次L‑异亮氨酸结晶晶体进行溶解，调pH值至5‑7，进行二次脱色，每100L清液中加入0.5‑2kg的活性炭；(6)二次蒸发结晶制得食品级L‑异亮氨酸产品：二次脱色后加入结晶蒸发器中进行蒸发结晶，真空度0.085‑0.094Mpa，加晶种前搅拌转速20‑50转/min,加晶种后搅拌转速100‑200转/min，结晶蒸发器中L‑异亮氨酸含量为250g/L放罐；放罐后直接离心分离，湿成品水分5％，得到二次L‑异亮氨酸结晶晶体，二次L‑异亮氨酸结晶晶体洗晶后烘干，得到合格的食品级L‑异亮氨酸产品；分离的精母液返回步骤(2)继续处理回用。2.根据权利要求1所述的L‑异亮氨酸的提取方法，其特征在于，所述步骤(3)中，结晶蒸发器内物料温度为50‑70℃，在蒸发至L‑异亮氨酸含量达到60‑70g/L时，向结晶蒸发器中加入食品级晶种，食品级晶种的添加质量为结晶蒸发器中物料质量的1‑5％。3.根据权利要求1所述的L‑异亮氨酸的提取方法，其特征在于，所述步骤(6)中，结晶蒸发器内物料温度为50‑70℃，在蒸发至L‑异亮氨酸含量达到60‑70g/L时，向结晶蒸发器中加入食品级晶种，食品级晶种的添加质量为结晶蒸发器中物料质量的1‑5％。4.根据权利要求1‑3任一所述的L‑异亮氨酸的提取方法，其特征在于，所述结晶蒸发器包括蒸发器壳体，所述蒸发器壳体内部设有结晶腔体，所述结晶腔体内部沿轴向设有搅拌轴，所述搅拌轴的一端贯穿所述蒸发器壳体并与无极调速装置的输出端固定连接，所述搅拌轴的另一端置于所述结晶腔体的中部，所述搅拌轴置于所述结晶腔体中部的一端固定连接有搅拌叶片；所述蒸发器壳体远离所述无极调速装置的一端设有出料口，所述出料口处设有第一放料阀门和第二放料阀门，所述第一放料阀门和所述第二放料阀门之间设有出口玻璃视镜，出料过程中先打开第一放料阀门，并通过玻璃视镜观察物料的结晶颗粒大小是否均匀，如达到出料颗粒大小要求，则破真空，破完后再打开第二放料阀门放罐；如未达到出料颗粒大小要求、细晶多，则关闭第一放料阀门，打开第二放料阀门，将样品排放收集，并加水消细晶，延长结晶时间；所述蒸发器