一种检测水中微囊藻毒素的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113655147A(43)申请公布日2021.11.16(21)申请号202110944173.9G01N30/36(2006.01)(22)申请日2021.08.17G01N30/60(2006.01)G01N30/72(2006.01)(71)申请人中国环境科学研究院地址100012北京市朝阳区洼里乡大羊坊8号(72)发明人刘琰葛思敏乔肖翠李雪赵兴茹刘承友齐童焦立新储昭升丁帅(74)专利代理机构北京格允知识产权代理有限公司11609代理人刘晓(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/14(2006.01)G01N30/34(2006.01)权利要求书2页说明书12页附图3页(54)发明名称一种检测水中微囊藻毒素的方法(57)摘要本发明涉及一种检测水中微囊藻毒素的方法，所述方法：将水样经过0.22μm的MCE滤膜过滤，然后通过在线固相萃取超高效液相色谱串联质谱法对过滤后的水样进行在线固相萃取与分析测定；在线固相萃取采用C8固相萃取柱；超高效液相色谱条件为：流动相：A液为0.1％甲酸乙腈溶液，B液为0.1％甲酸水溶液；梯度洗脱程序：0‑4.6min，98％B液；4.6‑10.0min，98％B液‑25％B液，10.0‑11.0min，25％B液‑100％B液；流速0.4mL/min；柱温35℃，进样体积：2mL。本发明方法是一种灵敏度高、准确性高、回收率和重现性良好，操作简便快捷的能同时测定水体中8种MCs的方法。CN113655147ACN113655147A权利要求书1/2页1.一种检测水中微囊藻毒素的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)将水样经过0.22μm的MCE滤膜过滤，得到预处理水样；(2)通过在线固相萃取超高效液相色谱串联质谱法对所述预处理水样进行在线固相萃取与分析测定；其中，在线固相萃取采用C8固相萃取柱；在进行分析测定时，超高效液相色谱条件为：采用流动相以梯度的方式进行洗脱：流动相：A液为0.1％甲酸乙腈溶液，B液为0.1％甲酸水溶液；梯度洗脱程序：0‑4.6min，2％A液，98％B液；4.6‑10.0min，2％A液‑75％A液，98％B液‑25％B液，10.0‑11.0min，75％A液‑0％A液，25％B液‑100％B液；流速0.4mL/min；柱温35℃，进样体积：2mL。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：采用的C8固相萃取柱为粒径为10μm、内径为2.1mm、柱长为30mm的C8DirectConnectHP固相萃取柱。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在进行分析测定时，超高效液相色谱采用的色谱柱为粒径为1.6μm，内径2.1mm，柱长为50mm的ACQUITYUPLCBEHC18色谱柱。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在进行分析测定时，质谱条件为：使用三重四极杆质谱仪，采用电喷雾离子源，正离子扫描以及多反应监测模式；毛细管电压：3.70kV；离子源温度：150℃；脱溶剂温度：500℃；脱溶剂气流量：1000L/h；锥孔气流量：50L/h；锥孔气压：30V；碰撞气流量：0.06mL/min。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法能同时检测水中8种微囊藻毒素；所述8种微囊藻毒素为MC‑LR、MC‑YR、MC‑RR、MC‑WR、MC‑LA、MC‑LF、MC‑LY、MC‑LW。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法在检测8种微囊藻毒素时的质谱测定参数为：MC‑LR，母离子995.4，定性离子135，定量离子213，锥孔电压85V，碰撞能量75eV；MC‑YR，母离子1045.6，定性离子135，定量离子213，锥孔电压85V，碰撞能量85eV；MC‑RR，母离子519.7，定性离子135，定量离子440.4，锥孔电压42V，碰撞能量32eV；MC‑WR，母离子1068.5，定性离子135，定量离子213，锥孔电压60V，碰撞能量95eV；MC‑LA，母离子910，定性离子135，定量离子776，锥孔电压40V，碰撞能量80eV；MC‑LF，母离子986.3，定性离子135，定量离子213，锥孔电压42V，碰撞能量68eV；MC‑LY，母离子1002.6，定性离子135，定量离子985，锥孔电压45V，碰撞能量80eV；MC‑LW，母离子1025.5，定性离子135，定量离子213，锥孔电压45V，碰撞能量65eV。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在进行步骤(2)之前，还包括往步骤(1)得到的预处理水样中加入浓度为1μg/L的亮氨酸脑啡肽甲醇溶液作为内标液的步骤。8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在进行步骤(2)之前，还