L-赖氨酸生产能力得到提高的谷氨酸棒状杆菌突变株及利用其的L-赖氨酸的生产方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115261295A(43)申请公布日2022.11.01(21)申请号202110721233.0(51)Int.Cl.(22)申请日2021.06.28C12N1/21(2006.01)C12P13/08(2006.01)(30)优先权数据C12R1/15(2006.01)10-2021-00555362021.04.29KR10-2021-00661512021.05.24KR(83)生物保藏信息KCCM12969P2021.04.02(71)申请人大象株式会社地址韩国首尔(72)发明人李怜株李善熙李汉珍朴硕贤朴俊炫(74)专利代理机构北京集佳知识产权代理有限公司11227专利代理师金世煜崔兰权利要求书1页说明书9页序列表2页附图3页(54)发明名称L-赖氨酸生产能力得到提高的谷氨酸棒状杆菌突变株及利用其的L-赖氨酸的生产方法(57)摘要本发明涉及L‑赖氨酸生产能力得到提高的谷氨酸棒状杆菌突变株及利用其的L‑赖氨酸的生产方法，上述突变株通过使编码天冬氨酸转氨酶的基因的表达增加或增强，从而与亲本菌株相比，可以提高L‑赖氨酸的生产收率。CN115261295ACN115261295A权利要求书1/1页1.一种谷氨酸棒状杆菌(Corynebacteriumglutamicum)突变株，其天冬氨酸转氨酶的活性增强而L‑赖氨酸生产能力得到提高。2.根据权利要求1所述的谷氨酸棒状杆菌突变株，其中，所述天冬氨酸转氨酶的活性增强是对编码天冬氨酸转氨酶的基因的启动子诱导位置特异性突变。3.根据权利要求2所述的谷氨酸棒状杆菌突变株，其中，所述编码天冬氨酸转氨酶的基因由SEQIDNO:1的碱基序列表示。4.根据权利要求1所述的谷氨酸棒状杆菌突变株，其中，所述突变株包含由SEQIDNO:2至4表示的碱基序列中的任一个。5.一种L‑赖氨酸的生产方法，包括以下步骤：a)在培养基中培养权利要求1所述的突变株的步骤；以及b)从所述突变株或者培养突变株的培养基中回收L‑赖氨酸的步骤。2CN115261295A说明书1/9页L‑赖氨酸生产能力得到提高的谷氨酸棒状杆菌突变株及利用其的L‑赖氨酸的生产方法技术领域[0001]本发明涉及L‑赖氨酸生产能力得到提高的谷氨酸棒状杆菌突变株及利用其的L‑赖氨酸的生产方法。背景技术[0002]L‑赖氨酸是人体或动物体内不能合成的必要氨基酸，必须从外部供给，一般情况下，是通过利用了细菌或酵母之类的微生物的发酵而生产的。L‑赖氨酸的生产可以利用自然状态下获得的野生型菌株或者以提高其L‑赖氨酸生产能力的方式转变的突变株。近年来，为了改善L‑赖氨酸的生产效率，以多用于L‑氨基酸和其它有用物质的生产的大肠杆菌、棒状杆菌等微生物为对象，适用基因重组技术，从而开发了具有优异的L‑赖氨酸生产能力的各种重组菌株或突变株及利用其的L‑赖氨酸生产方法。[0003]根据韩国授权专利第10‑0838038号和第10‑2139806号，通过变更对包含与L‑赖氨酸生产有关的酶的蛋白质进行编码的基因的碱基序列或氨基酸序列来增加该基因的表达或者剔除不必要的基因，从而可以提高L‑赖氨酸生产能力。此外，在韩国公开专利第10‑2020‑0026881号中公开了为了增加对参与L‑赖氨酸生产的酶进行编码的基因的表达而将基因的现有启动子变更为具有强活性的启动子的方法。[0004]如上所述，开发了增加L‑赖氨酸生产能力的各种方法，但与L‑赖氨酸生产直接或间接相关的酶、转录因子、运输蛋白质等蛋白质的种类达到数十余种，因此关于根据这样的蛋白质的活性变化的L‑赖氨酸生产能力是否增加，事实上仍需要大量的研究。[0005]现有技术文献[0006]专利文献[0007]韩国授权专利第10‑0838038号[0008]韩国授权专利第10‑2139806号[0009]韩国公开专利第10‑2020‑0026881号发明内容[0010]本发明的目的在于提供L‑赖氨酸生产能力得到提高的谷氨酸棒状杆菌(Corynebacteriumglutamicum)突变株。[0011]另外，本发明的目的在于提供利用了上述突变株的L‑赖氨酸的生产方法。[0012]本发明的发明人为了利用谷氨酸棒状杆菌菌株来开发L‑赖氨酸生产能力得到提高的新型突变株而进行了研究，结果确认了当将对在L‑赖氨酸生物合成途径中参与作为赖氨酸前体的天冬氨酸的供给的天冬氨酸转氨酶进行编码的aspB基因的启动子中特定位置的碱基序列进行置换时，L‑赖氨酸生产量增加，从而完成了本发明。[0013]本发明的一个方式提供天冬氨酸转氨酶的活性增强而L‑赖氨酸生产能力得到提高的谷氨酸棒状杆菌突变株。3CN115261295A说明书2/9页[0014]本发明中所使用的“天冬氨酸转氨酶(as