细胞选择方法、细胞检测方法、细胞选择装置及检测装置.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107034269A(43)申请公布日2017.08.11(21)申请号201611016107.0(22)申请日2016.11.18(30)优先权数据2015-2342152015.11.30JP(71)申请人希森美康株式会社地址日本兵库县神户市中央区脇浜海岸通1丁目5番1号(72)发明人高桥佑介柳田匡俊(74)专利代理机构北京市安伦律师事务所11339代理人郭扬杨永波(51)Int.Cl.C12Q1/68(2006.01)C12M1/34(2006.01)权利要求书4页说明书20页附图20页(54)发明名称细胞选择方法、细胞检测方法、细胞选择装置及检测装置(57)摘要课题：提供一种能精确检测出异常细胞的细胞选择方法、细胞检测方法、细胞选择装置和细胞检测装置。解决手段：细胞选择方法包括以下步骤：步骤S11的试样制备步骤，即用第一荧光色素对细胞中的核酸染色，并使含第二荧光色素的评价用探针与细胞中DNA的评价对象区杂交，以此制备试样；步骤S12的受光步骤，即用光照射试样，并接收来自第一荧光色素的荧光和来自第二荧光色素的荧光；步骤S13的选择步骤，即根据来自第一荧光色素的荧光的强度和来自第二荧光色素的荧光的强度选择分析对象细胞。第一荧光色素是发出第一波长荧光的色素，第二荧光色素是发出不同于第一波长的第二波长荧光的色素。CN107034269ACN107034269A权利要求书1/4页1.一种细胞选择方法，其包括以下步骤：试样制备步骤，用第一荧光色素对细胞中的核酸染色，并使含第二荧光色素的评价用探针与所述细胞中DNA的评价对象区杂交，以此制备试样；受光步骤，用光照射所述试样，并接收来自所述第一荧光色素的荧光和来自所述第二荧光色素的荧光；选择步骤，根据来自所述第一荧光色素的荧光的强度和来自所述第二荧光色素的荧光的强度选择分析对象细胞；其中，所述第一荧光色素是发出第一波长的荧光的色素，所述第二荧光色素是发出不同于所述第一波长的第二波长荧光的色素。2.根据权利要求1所述的细胞选择方法，其特征在于：在所述受光步骤，用光照射流经流动室的所述试样，并接收来自所述第一荧光色素的荧光和来自所述第二荧光色素的荧光。3.根据权利要求1所述的细胞选择方法，其特征在于：在所述受光步骤，用光照射放在基材上的所述试样，用显微镜接收来自所述第一荧光色素的荧光和来自所述第二荧光色素的荧光。4.根据权利要求1至3其中任意一项所述的细胞选择方法，其特征在于：在所述选择步骤，选择来自所述第一荧光色素的荧光的强度和来自所述第二荧光色素的荧光的强度之比率被评价为在一定范围内的细胞作为分析对象细胞。5.根据权利要求1至4其中任意一项所述的细胞选择方法，其特征在于：为检测出所述细胞中的基因组异常而选择所述分析对象细胞，所述基因组异常是指基因扩增、缺失、易位及倒位中的某一者。6.根据权利要求5所述的细胞选择方法，其特征在于：当所述基因组异常为基因扩增时，所述评价对象区是所述细胞的细胞核中的DNA序列区中除出现扩增的DNA序列区的DNA序列区的部分序列，当所述基因组异常为缺失时，所述评价对象区是所述细胞的细胞核中的DNA序列区中除出现缺失的DNA序列区的DNA序列区的部分序列。7.根据权利要求1至6其中任意一项所述的细胞选择方法，其特征在于：所述评价用探针含有与所述评价对象区互补的、且与所述第二荧光色素结合的多核苷酸。8.一种细胞选择方法，其包括以下步骤：试样制备步骤，用第一荧光色素对细胞中的核酸染色，并使含第二荧光色素的评价用探针与所述细胞中DNA的评价对象区杂交，以此制备试样；拍摄步骤，用光照射所述试样，并对所述试样中的所述细胞进行拍摄；亮度获取步骤，根据在所述拍摄步骤拍摄的所述细胞的图像获取来自所述第一荧光色素的荧光的图像的亮度和来自所述第二荧光色素的荧光的图像的亮度；选择步骤，根据来自所述第一荧光色素的荧光的图像的亮度和来自所述第二荧光色素的荧光的图像的亮度选择分析对象细胞；其中，所述第一荧光色素是发出第一波长的荧光的色素，所述第二荧光色素是发出不同于所述第一波长的第二波长荧光的色素。2CN107034269A权利要求书2/4页9.一种细胞检测方法，其包括以下步骤：试样制备步骤，用第一荧光色素对细胞中的核酸染色，用含第二荧光色素的评价用探针与所述细胞中DNA的评价对象区进行杂交，并用含第三荧光色素的检测用探针与所述细胞中DNA的检测对象区杂交，以此制备试样；受光步骤，用光照射所述试样，并接收来自所述第一荧光色素的荧光、来自所述第二荧光色素的荧光和来自所述第三荧光色素的荧光；选择步骤，根据来自所述第一荧光色素的荧光的强度和来自所述第二荧光色素的荧光的强度选择分析对象细胞；检测步骤，根据来自所述第三荧