《DNA重组技术的基本工具》课件3.ppt

你还记得我们吗？专题1.基因工程的基本内容基因工程的概念：别名：操作环境：原理：操作水平：结果：基因工程的产物基因工程的概念普通棉花抗虫棉基因工程培育抗虫棉的简要过程：解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？1.1、DNA重组技术的基本工具1、简称：2、分布：原核生物易受自然界外源DNA的入侵，但生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。思考与探究P7限制酶的识别特点EcoRⅠ（在G与A之间切割）3、特点:什么叫黏性末端？SmaⅠ④作用：⑤结果：3、特点:要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？Goback1、作用:可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，3、类型：3、类型例.限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段:你是否能用DNA连接酶将它们连接起来？4、DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？1、载体必须具备的条件：①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存；②具有一至多个限制酶切点，以便与外源基因连接③具有某些标记基因，便于进行筛选。④对受体细胞无害2、常用的载体：质粒，λ噬菌体的衍生物，动植物病毒等能复制并带着插入的目的基因一起复制工具3：运载体3、天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？为什么？2和7能连接形成…ACGT……TGCA…；4和8能连接形成…GAATTC……CTTAAG…；3和6能连接形成…GCGC……CGCG…；1和5能连接形成…CTGCAG……GACGTC…。1、在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（）同种限制酶B.两种限制酶同种连接酶D.两种连接酶2、不属于质粒被选为基因运载体的理由是A、能复制（）B、有多个限制酶切点C、具有标记基因D、它是环状DNA3、下列不适合用于基因工程的运载体是（）A、质粒B、噬菌体C、细菌D、病毒5、以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，试分析：①GC…②AATTC…③…GC④…CTTAACG…G……CG…G1.1944年艾弗里(O.Avery)等进行了肺炎双球菌体外转化实验,证明了DNA是生物的遗传物质,并且证明了DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体,成为基因工程的先导2.1953年沃森和克里克建立了双螺旋结构模型,使生物学进入分子水平。3.1963年尼伦伯格和马太做蛋白质体外合成实验,破译编码氨基酸的遗传密码.1)基因转移载体的发现2)工具酶的发现3)DNA合成和测序技术的发明4)DNA体外重组的实现1973年博耶和科恩使重组DNA转入大肠杆菌中,转录出相应的mRNA,并使外源基因可以在原核细胞中成功表达,至此表明基因工程正式问世.1980年第一个转基因小鼠问世