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第31讲微生物的利用[加试题组](1)从生态系统的成分上看大肠杆菌属于。(2)若根据用途划分该培养基属于(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌培养基的营养成分必需怎样更改?并用作为指示剂。(3)在微生物培养的过程中为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行;操作者的双手需要进行清洗和。(4)图1和图2是培养某细菌的结果图其对应的接种方法分别是:和这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的。图1所用的接种方法可用来对活菌进行计数。此外测定微生物数目的另一种方法是____________________________。解析(1)大肠杆菌为厌氧性细菌在生态系统中属于分解者。(2)该培养基属于鉴别培养基如果需要筛选出土壤中的尿素分解菌则应将蛋白胨改成尿素然后用酚红作为指示剂。(3)为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行灭菌处理且双手需要清洗和消毒。(4)图1为稀释涂布平板法图2为平板划线法单个细胞繁殖所形成的为菌落测定微生物的方法有活菌计数法和血球计数板计数法。(5)大肠杆菌属于原核生物。制作果酒为酵母菌酵母菌属于真核生物A错误。由果酒制作果醋所利用的微生物是醋酸菌醋酸菌属于原核生物B正确。制作泡菜所利用的微生物是乳酸菌乳酸菌属于原核生物C正确。制作腐乳所利用的微生物主要是毛霉毛霉属于真核生物D错误。答案(1)分解者(2)鉴别将蛋白胨改成尿素酚红(3)灭菌消毒(4)稀释涂布平板法平板划线法菌落显微镜直接计数(或“血球计数板计数法”)(5)BC2.(2015·浙江杭州一模17)据报道一些企业生产的速冻食品中检出金黄色葡萄球菌超标加上熟卤制品的大肠杆菌超标“细菌门”事件引起公众普遍关注。金黄色葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题:接种:该小组采用涂布分离法检测果汁样品的细菌含量。在涂布接种前随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间这样做的目的是__________________________________;然后将1mL果汁样品稀释10倍在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液。培养及结果:将培养皿放入恒温培养箱中经适当培养3个平板上的菌落数分别为19、18和17。据此可得出每升果汁样品中的活菌数为。(2)示意图A和B中表示的是用涂布分离法接种培养后得到的结果。(3)下列有关常用涂布分离法的操作正确的是。A.在超净工作台中进行接种时应关闭紫外灯B.接种前需先稀释然后过滤除去杂菌C.在每个固体培养基表面都可形成单菌落D.玻璃刮刀浸泡在70%的酒精中灭菌不用灼烧(4)菌种保存:在无菌条件下将单菌落用接种环取出再用划线法接种在上在37℃下培养24h后置于4℃冰箱中保存。解析(1)培养基配制好后应调节酸碱度(pH)分装到锥形瓶后利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。涂布接种前将制好的空白平板先培养一段时间目的是检测培养基是否被杂菌污染;接种后培养皿需要倒置培养防止皿盖上凝集的水滴滴落造成污染;0.1mL稀释液(稀释10倍)含细菌数约为18个得出每升果汁含有活菌数1.8×106个。(2)图中A为划线分离得到的结果B为涂布分离得到的结果。(3)在超净工作台进行接种操作时应关闭紫外灯A正确;涂布分离前需稀释但不能过滤除菌B错误;稀释度较大的溶液涂布分离不一定出现菌落C错误;玻璃刮刀浸泡后需要灼烧D错误。(4)纯化的菌种保存在斜面上。答案(1)调节pH高压蒸汽灭菌锅检测培养基平板灭菌是否合格倒置1.8×106(2)B(3)A(4)斜面1.实验室常用的消毒和灭菌的方法灭菌2.微生物培养后判断是否有杂菌污染的方法[备考备查]2.无菌技术(3)三种常用灭菌方法的比较(4)避免被杂菌污染的方法①注意灭菌操作原则灭菌彻底降低环境污染几率、手和实验服要清洁减少操作时间对污染源的改善考虑周到。②注意微生物生长条件如pH、渗透压、温度等。细菌喜中性偏碱的环境喜蛋白质丰富的营养物质喜37℃的温度;而霉菌喜中性偏酸的环境喜糖类丰富的营养物质喜25~30℃的温度。因此可以根据不同微生物的“喜好”来减少污染。3.微生物的纯化培养技术②涂布分离法:是将菌液进行一系列的取0.1mL稀释度不同的菌液加在培养皿的固体培养基上用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养。在适当的稀释度下即可获得相互分开的。系列稀释操作(如下图所示)温馨提示平板划线操作的注意事项(2)灼烧接种环之后待其冷却后才能伸入菌液以免温度太高杀死菌种。(3)第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始目