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本发明公开了一种鸭大肠杆菌的高密度发酵方法,以高密度发酵培养基为基础,使用发酵罐进行鸭大肠杆菌高密度发酵。发酵过程中,设定pH7.0~7.5、温度36.5~37.5℃、转速90~420rpm、空气通气量1.2~5.2L/min。接种前流加适量消泡剂,接种后,待细菌OD600nm达到4.0~6.0时,以流速10~25mL/h/L流加45~55(w/v)%葡萄糖溶液,流加葡萄糖的量为每升高密度发酵培养基流加葡萄糖50~100g。本发明所述的鸭大肠杆菌高密度发酵方法,基于高密度发酵培养基,其营养丰富,通过流加葡萄糖,可实现鸭大肠杆菌高密度发酵,可用于大规模发酵生产鸭大肠杆菌疫苗。