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本发明涉及检测技术领域,特别是涉及一种基于Cas12a蛋白的阪崎肠杆菌检测方法及其应用,该检测方法采用由阪崎肠杆菌rpoB基因设计得到的RPA扩增引物组,在等温条件下利用Cas12a蛋白、crRNA、DNA报告分子和RPA扩增引物组检测阪崎肠杆菌。本发明提供了一种方便快捷、准确度高的阪崎肠杆菌检测方法,可准确鉴定阪崎肠杆菌DNA,操作简便,无需像PCR一样通过变温仪器实现扩增检测,只需在37℃下进行等温扩增,10~60min即可完成检测。