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本发明公开了是一种DNA纳米花及其制备方法和用途。本发明着眼于协同促进骨形成和抗骨吸收的治疗策略,通过优化的滚环扩增技术构建了富含Ca2+和多价CpG的新型DNA纳米花(DNFs)用于治疗骨质疏松。相较于现有的骨质疏松治疗药物,DNFs利用破骨细胞与骨表面的酸性微环境酸响应释放Ca2+,通过增强骨质胶原矿化修复受损的骨组织,增强骨骼硬度。另一方面,DNFs可利用多价CpG通过细胞免疫调节抑制破骨细胞活力,减少破骨细胞对骨骼的吸收作用。本发明制备的DNFs可有效协同免疫调节和增强骨修复联合治疗骨质疏松,有望拓展DNA纳米材料应用的广泛性,也为纳米技术治疗骨质疏松提供新的理论依据和技术保障。