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胞内劳森菌的培养方法及应用.pdf

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本发明公开了一种胞内劳森菌的培养方法,包括以下步骤:步骤1:贴壁培养猪肠道细胞;步骤2:待细胞贴壁培养6～8h,将胞内劳森菌与细胞培养液按体积比0.01～1:1接种至细胞中,置于改良的微需氧环境中培养1～96h;步骤3:胰酶消化感染的细胞后,收集感染细胞,并用细胞冻存液重悬感染细胞,转入液氮罐中保存。还公开由所述的培养方法培养的胞内劳森菌的应用,应用于胞内劳森菌分离培养和病原性特征的研究中。本发明应用猪肠道细胞来培养胞内劳森菌,严格模拟宿主体内的体外培养环境,并且应用改良后的微需氧培养箱来培养胞内劳森菌,操作简单,培养周期短,成本低,大大增加培养胞内劳森菌的成功率。