禽传染性支气管炎弱毒疫苗株、疫苗及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106754746A(43)申请公布日2017.05.31(21)申请号201611087398.2G01N33/569(2006.01)(22)申请日2016.11.30A61K39/215(2006.01)A61P31/14(2006.01)(83)生物保藏信息CCTCCNO：V2016482016.09.16CCTCCNO：V2016472016.09.16(71)申请人中山大学地址510000广东省广州市海珠区新港西路135号(72)发明人曹永长张芸曾钰尧尹丽娟薛春宜先国兰郭超罗鸿斌(74)专利代理机构北京市盈科律师事务所11344代理人刘雪花(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书13页C12N7/00(2006.01)序列表14页附图5页(54)发明名称禽传染性支气管炎弱毒疫苗株、疫苗及其应用(57)摘要本发明公开了禽传染性支气管炎弱毒疫苗株、疫苗及其应用，具体公开了S株和SU株，以及这两株弱毒疫苗株在制备禽传染性支气管炎疫苗中、作为免疫原使用的蛋白质或多肽中、作为用于检测血清中特异性抗体的蛋白质抗原中的应用。S株可作为弱毒疫苗直接应用于预防家禽免于禽传染性支气管炎的感染及传播。S株对SPF鸡毒力较弱，感染鸡不出现发病及死亡症状，不易传播且排毒率低，安全性高，可针对国内优势IBV种群进行免疫保护，有效性良好。SU株对SPF鸡安全，免疫保护效果与市售LDT3、H120效果相近，具有作为安全疫苗候选株的可能。CN106754746ACN106754746A权利要求书1/1页1.一种禽传染性支气管炎弱毒疫苗株S，保藏编号为CCTCCNO：V201647。2.一种禽传染性支气管炎疫苗组合物，其特征在于，包含弱毒疫苗株S和药学上可接受的佐剂或载体。3.弱毒疫苗株S在制备禽传染性支气管炎疫苗中的应用。4.弱毒疫苗株S在制备作为免疫原使用的蛋白质或多肽中的应用。5.弱毒疫苗株S在制备作为用于检测血清中特异性抗体的蛋白质抗原中的应用。6.一种禽传染性支气管炎弱毒疫苗株SU，保藏编号为CCTCCNO：V201648。7.一种禽传染性支气管炎疫苗组合物，其特征在于，包含弱毒疫苗株SU和药学上可接受的佐剂或载体。8.弱毒疫苗株SU在制备禽传染性支气管炎疫苗中的应用。9.弱毒疫苗株SU在制备作为免疫原使用的蛋白质或多肽中的应用。10.弱毒疫苗株SU在制备作为用于检测血清中特异性抗体的蛋白质抗原中的应用。2CN106754746A说明书1/13页禽传染性支气管炎弱毒疫苗株、疫苗及其应用技术领域[0001]本发明涉及疫苗领域，尤其涉及禽传染性支气管炎疫苗株、疫苗及其应用。背景技术[0002]禽传染性支气管炎(InfectiousBronchitis,IB)是由禽传染性支气管炎病毒(InfectiousBronchitisVirus,IBV)引起的高传染性病毒性疾病。其高致病性、接触性传染和全球广泛分布的特征使其成为除新城疫和高致病性禽流感外被广泛研究的病毒学呼吸道疾病。禽传染性支气管炎病毒对于不同日龄的鸡只都有感染性，其对于不同组织的嗜性使得感染部位不局限于呼吸道，胃、肠道、肾脏和输卵管等部位都会发生病变(Cavanagh2007)。禽传染性支气管炎病毒(IBV)致病率高达100％，感染雏鸡的死亡率为25％-30％(Bande,2015)。感染雏鸡若与其他细菌性或病毒性病原一起发生混合或继发感染，会增加鸡只死亡率(Matthijs,2003)。从1931年首次发现至今(Schalk,1931)，禽传染性支气管炎的爆发在世界各国多有报道。20世纪90年代后至今，该病在国内频繁爆发，使得感染鸡群肉鸡质量下降，蛋鸡产蛋量下降，给我国养禽业带来极大的经济损失。[0003]禽传染性支气管炎病毒属于尼多病毒目(Nidovirales)，冠状病毒科(Coronaviridae)，冠状病毒属(Coronavirus)。该病毒为带囊膜，不分节段的单股正链RNA病毒。病毒粒子直径为80-120nm，囊膜表面均布着约20nm长的纤突。病毒基因组编码的主要结构蛋白为纤突蛋白(S,spike)、基质蛋白(M,matrix)、核衣壳蛋白(N,nucleocapsid)和囊膜蛋白(E,envelope)(Bande,2015)。S蛋白是高度糖基化跨膜蛋白，大小为150-200kDa。该蛋白在宿主细胞受体识别、抗体诱导、致病性和基因分型等方面起着关键作用(Bande,2015)。S蛋白基因转译后被裂解为S1(520aa)和S2(625aa)两个亚基。其中，S1蛋白识别并结合宿主细胞受体，S2蛋白通过构象变化，使病毒囊膜和宿主细胞膜融合，让病毒基因组进入宿主细胞中(Belouzard,2012)。