一种水凝胶修复面膜的制备方法及其产品.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115944579A(43)申请公布日2023.04.11(21)申请号202211613091.7A61K8/73(2006.01)(22)申请日2022.12.15A61K8/04(2006.01)A61Q19/08(2006.01)(71)申请人上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司地址201109上海市闵行区剑川路468号(72)发明人崔大祥徐艳徐颖湉朱君杨迪诚(74)专利代理机构上海东亚专利商标代理有限公司31208专利代理师董梅(51)Int.Cl.A61K8/99(2017.01)C12N5/04(2006.01)A61K8/9789(2017.01)A61K8/64(2006.01)权利要求书2页说明书3页附图1页(54)发明名称一种水凝胶修复面膜的制备方法及其产品(57)摘要本发明涉及一种水凝胶修复的制备方法及其产品，具体涉及一种采用含有植物外泌体的促进皮肤修复的水凝胶面膜的制备方法。葡萄外泌体作为一种天然的纳米囊泡结构，具有良好的生物相容性，具备抗氧化能力，有助于消除皮肤修复过程中的炎症反应，恢复皮肤正常的氧化还原水平；壳聚糖有助于皮肤保湿，可以提高皮肤免疫能力，具备镇静舒缓效果；生长因子与丝素蛋白可以促进成纤维细胞的分裂、增殖，改善皮肤微循环。几种活性成分相互协同增效，具备促进皮肤修复的功能。本发明采用植物外泌体制备水凝胶面膜，免疫原性低，来源广泛；凝胶面膜制备方法简单易操作，不需要复杂的生产设备，易于进行宏量化生产。CN115944579ACN115944579A权利要求书1/2页1.一种水凝胶修复面膜的制备方法，其特征在于采用含有植物外泌体制备促进皮肤修复的水凝胶面膜，包括以下步骤：（1）葡萄外泌体提取：将葡萄打浆均匀后抽滤去除明显的纤维和杂质，滤液在4℃以500g离心10min，上清液以2000g继续离心10min，上清液进一步以15000g离心30min，采用0.22μm的滤膜过滤去除干细胞或者细胞碎片，过滤液在4℃的条件下以120000g转速离心90min，弃去上清；采用PBS重悬沉淀，继续在4℃条件下以120000g转速离心90min，弃去上清，采用PBS重悬沉淀，得到外泌体，在‑80℃条件下长期保存，或加入1%甘露糖后对外泌体冻干保存；（2）水凝胶面膜制备：将葡萄外泌体、1~20wt%g壳聚糖、10~30wt%N‑丙烯酰甘氨酸酰胺NAGA、1‑50ng/mL生长因子、0.1~5wt%丝素蛋白SF、0.1wt%光引发剂（Irgacure2959）溶2解于水中，50℃混合均匀，将溶液注入模具，365nmUV（10mW/cm）光源照射5~10min后，形成附载外泌体的水凝胶修复面膜。2.根据权利要求1所述水凝胶修复面膜的制备方法，其特征在于所述生长因子为EGF、VEGF、FGF中的任一种。3.根据权利要求1或2所述水凝胶修复面膜的制备方法，其特征在于，按以下步骤制备：（1）葡萄外泌体提取：将100g的葡萄打浆均匀后抽滤去除明显的纤维和杂质，滤液在4℃以500g离心10min，上清液以2000g继续离心10min，上清液进一步以15000g离心30min，采用0.22μm的滤膜过滤去除干细胞或者细胞碎片，过滤液在4℃的条件下以120000g转速离心90min，弃去上清；采用PBS重悬沉淀，继续在4℃条件下以120000g转速离心90min，弃去上清，采用PBS重悬沉淀，得到外泌体在‑80℃条件下长期保存；（2）水凝胶面膜制备：将得到的葡萄外泌体、10wt%g壳聚糖、30wt%N‑丙烯酰甘氨酸酰胺NAGA、10ng/mL生长因子VEGF、1wt%丝素蛋白SF、0.1wt%光引发剂（Irgacure2959）溶解2于水中，50℃混合均匀，将溶液注入模具，365nmUV（10mW/cm）光源照射5~10min后，形成附载外泌体的水凝胶修复面膜。4.根据权利要求1或2所述水凝胶修复面膜的制备方法，其特征在于，按以下步骤制备：（1）葡萄外泌体提取：将100g的葡萄彻底打浆均匀后抽滤去除明显的纤维和杂质，滤液在4℃以500g离心10min，上清液以2000g继续离心10min，上清液进一步以15000g离心30min，采用0.22μm的滤膜过滤去除干细胞或者细胞碎片，过滤液在4℃的条件下以120000g转速离心90min，弃去上清；采用PBS重悬沉淀，继续在4℃条件下以120000g转速离心90min，弃去上清，采用PBS重悬沉淀，得到外泌体，可在在‑80℃条件下长期保存；（2）水凝胶面膜制备：将得到的葡萄外泌体、20wt%壳聚糖、25wt%NAGA、10ng/mLEGF、0.5wt%丝素蛋白、0.1wt%Irgacure2959溶解于水中，5