一种细胞化纤维支架及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115944784A(43)申请公布日2023.04.11(21)申请号202310008350.1(22)申请日2023.01.04(71)申请人南通大学地址226019江苏省南通市崇川区啬园路9号(72)发明人王鸿奎薛成斌钱天梅朱慧陆潘建顾晓松杨宇民(74)专利代理机构南京经纬专利商标代理有限公司32200专利代理师黄欣(51)Int.Cl.A61L27/36(2006.01)A61L27/50(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图7页(54)发明名称一种细胞化纤维支架及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种细胞化纤维支架及其制备方法和应用；该细胞化纤维支架包括纤维支架和支持细胞，支持细胞粘附和/或包绕在纤维支架表面，所述纤维支架为脱丝胶后的丝素纤维，所述支持细胞为由皮肤源性前体细胞分化得到的施万细胞（SKP‑SCs）。本发明利用SKP‑SCs制成含SKP‑SCs的纤维支架，并将其移植到宿主皮下预血管化，然后与神经导管进行组装，从而得以更加快速地构建预血管化组织工程神经同时仍含有大量存活支持细胞；之后将其用于移植修复大鼠坐骨神经长距离缺损，可实现血管及支持细胞的双重再生促进因素的叠加，进而提高神经损伤修复效果。CN115944784ACN115944784A权利要求书1/1页1.一种细胞化纤维支架，其特征在于：包括纤维支架和支持细胞，所述支持细胞粘附和/或包绕在纤维支架表面；所述支持细胞为由皮肤源性前体细胞分化得到的施万细胞；所述纤维支架由生物可降解材料制成，所述生物可降解材料为丝素蛋白、壳聚糖、胶原、脱细胞基质、聚乳酸或聚羟基乙酸中的一种或几种。2.权利要求1所述的细胞化纤维支架的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1，将支持细胞经体外培养得到支持细胞悬液；步骤2，将步骤1的支持细胞悬液与纤维支架体外共培养，得到所述细胞化纤维支架。3.权利要求1所述的细胞化纤维支架在制备预血管化的组织工程神经中的应用。4.一种预血管化的组织工程神经，其特征在于：由权利要求1所述的细胞化纤维支架制得。5.权利要求4所述的预血管化的组织工程神经在制备周围神经缺损再生产品中的应用。6.一种周围神经缺损再生产品，其特征在于：包括神经导管和权利要求4所述的预血管化的组织工程神经，所述预血管化的组织工程神经置于神经导管内。7.根据权利要求6所述的周围神经缺损再生产品，其特征在于：所述神经导管由生物可降解材料制成，所述生物可降解材料为丝素蛋白、壳聚糖、胶原、脱细胞基质、聚乳酸或聚羟基乙酸中的一种或几种。2CN115944784A说明书1/6页一种细胞化纤维支架及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种细胞化纤维支架及其制备方法和应用。背景技术[0002]组织工程组织器官，不单单要修复形态，更重要是实现其功能化即生理性能重建；其中新的血管网络的快速重建是组织工程组织器官体内存活的前提，也是生理性能重建的基础。组织工程临床应用的瓶颈问题，即组织工程组织器官的血管新生。氧气最大的自由弥散距离约200µm，一旦超过这个距离就需要形成新的血管提供氧气以维持组织器官的生存。所以，组织工程组织器官植入体内后如何迅速地与周围组织建立起有效的血液循环，对于其自身存活和生理性能重建至关重要。[0003]目前，组织工程神经的血管化研究集中在体内修复过程中如何增加新生血管数量的探索上，即添加某种生长因子或支持细胞用以提升血管新生从而促进神经再生。比如组织工程神经中直接加入促血管生成的生长因子，如VEGF和bFGF等，或是在组织工程神经的构建过程中加入种子细胞，如血管内皮细胞，或植入干细胞或干细胞分化的血管内皮细胞。除此之外，还可以在生物材料支架方面进行物理或化学的修饰，进一步提高组织工程神经修复神经损伤过程中的血管生成。但是，不含血管的人工神经移植物在修复神经再生过程中，尤其再生早期的神经再生局部微环境处于缺氧状态，特别是对于长距离周围神经缺损，这极大地迟缓和制约了神经再生的速度及效果。[0004]组织工程神经的预血管化是一个更有前景的研究方向和构建策略，可以进一步提升临床周围神经损伤修复效果。目前，在体外模拟复杂天然、成熟血管系统还面临巨大的挑战。最常见的利用血管内皮细胞（或干细胞诱导分化来源的内皮细胞）体外构建血管网络后再体内移植与宿主的血管网发生吻合的缺点在于要获得成熟、稳定、长期的毛细血管网；即便是可以利用多种细胞体外构建血管网络、但涉及的过程复杂，操作性、可控性较差。较之体外，通过皮下或肌间隙等体内植入的方式实现组织工程神经的预血管化则更加简单和可行，特别是体内获取的成熟和丰富的血管网络能更快地与机体血管吻合和再通以缓解局部的缺氧状况。现有的利用一