笃斯越橘离体培养及植株再生研究.doc

笃斯越橘离体培养及植株再生研究笃斯越橘(VacciniumulignosumL.)属杜鹃科(Ericaceae)越橘属(Vacciniumspp.)灌木果树,俗称都柿,又名蓝莓(Blueberry)、蓝浆果。其果实中含有较多的花色素苷、黄酮等生理活性成分,有防治高血压、疏通毛细血管和缓解视力疲劳的作用,被誉为“浆果之王”,被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一。近10多年来,世界越橘种植面积和产量大幅增加。近20多年来,中国越橘产业有了快速发展,成为目前最具发展潜力的水果之一。本试验以经优株选择后的野生笃斯越橘为实验材料,通过组织培养的方法,研究了以茎段和单芽为外植体时,培养基、激素、pH、培养时间等因素对植株再生的影响,建立了野生笃斯越橘再生体系,研究结果如下：1经过室内水培后枝条,约1周后可长出长约1cm的绿色单芽,将单芽作为外植体进行培养,伸长生长效果明显。外植体经过低温10℃处理,可以减少褐变的发生,可使外植体处于旺盛的生长状态,减少了褐变的发生,增大了芽体的存活率。2在外植体的消毒灭菌过程中,以茎段作外植体的污染率为35%,一周后长出幼嫩的绿芽。以单芽为外植体污染率低于用茎段作外植体,污染率为11.67%,少部分在培养过程中易发生褐变,但其伸长生长较快。3单芽茎段生长培养最佳培养基为改良WPM+1.5mg/LZT+0.3mg/LNAA+30g/L蔗糖+8g/L琼脂。最佳培养条件为pH值调到5.4,光照时间设为8时/日,培养温度设为25/15℃(日/夜)；单芽生长培养最佳培养基为WPM+2.0mg/LZT+0.5mg/LNAA+25g/L蔗糖+8g/L琼脂。最佳培养条件为pH值调到4.8,光照时间设为8时/日,培养温度设为25/15℃(日/夜)。4取由单芽经生长培养后获得的健壮丛生芽为外植体,进行继代培养,单芽增殖培养最佳培养基为WPM+1.5mg/LZT+1.5mg/L6-BA+15g/L蔗糖+8g/L琼脂,最佳继代次数为3次。最佳培养条件为pH值调到5.4,光照时间设为8时/日,培养温度设为25/15℃(日/夜)。5以单芽为外植体经过增殖培养后,将获得的健壮幼苗从茎基部切下,接种到壮苗培养基上培养30天,然后再接入到生根培养基上。生根培养最佳培养基为1/2WPM+0.1mg/LIBA+1.5mg/LIAA+15g/L蔗糖+8g/L琼脂。最佳培养条件为pH值调到5.6,光照时间设为8时/日,培养温度25℃。