丙泊酚复合电休克改善抑郁大鼠学习记忆的机制.doc

丙泊酚复合电休克改善抑郁大鼠学习记忆的机制目的通过观察丙泊酚复合电休克(electroconvulsivetherapy,ECT)对抑郁大鼠行为和学习记忆的影响,以及丙泊酚复合电休克处理后抑郁大鼠海马组织Fos蛋白、神经元型一氧化氮合酶(neuronalnitricoxidesynthase,nNOS)mRNA和蛋白的表达,一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)活性和NO含量的变化,探讨丙泊酚复合ECT对抑郁大鼠学习记忆的影响机制。方法将60只成年雄性SD大鼠随机分成5组(n=12):对照组(C组),抑郁模型组(D组),传统ECT组(E组),丙泊酚复合ECT组(M组)和丙泊酚组(P组)。C组正常喂养,其余组建立慢性轻度不可预见性应激(chronicunpredictablemildstress,CUMS)抑郁模型。建模成功后,D组不予治疗,E组和M组分别给予单纯ECT和丙泊酚复合ECT各6次治疗,P组则于ECT相应时点腹腔注射丙泊酚100mg/kg。各组分别于造模前、造模后、干预后用旷场法(open-fieldtest)进行行为评分:水平计分和垂直计分。干预后测评学习记忆功能:Morris水迷宫法测试逃避潜伏期和平台象限距离百分比。所有测试结束后,采全部大鼠脑海马组织,免疫组化法检测Fos和nNOS蛋白表达,图像分析系统分析其免疫反应阳性表达产物,检测阳性产物相对切面面积比(阳性细胞面积和视场面积的百分比)和平均目标灰度值(所测阳性细胞平均灰度);RT-PCR法检测nNOS-mRNA表达;用分光光度计检测NOS活性和NO含量。全部数据采用非参数检验和方差分析(ANOVA)进行统计处理。结果行为评分:水平计分和垂直计分,C组各时点差异无统计学意义。D组、P组造模后和干预后差异无统计学意义,均低于造模前。E组、M组造模后、干预后均低于造模前,但干预后高于造模后。造模前各组间差异无统计学意义,造模后D组、E组、P组和M组间差异无统计学意义,均小于C组。干预后,D组、E组、P组和M组均小于C组,E组、M组高于D组、P组,而D组和P组间,E组和M组间差异均无统计学意义。逃避潜伏期:干预后C组和M组差异无统计学意义,但短于D组、P组及E组,而D组和P组差异无统计学意义,但长于E组;平台象限距离百分比:结果与逃避潜伏期的变化相反。大鼠脑海马组织的Fos和nNOS阳性神经元切面面积比:C组、P组和M组之间差异无统计学意义,但均低于D和E组,而E组高于D组;平均灰度值变化与阳性神经元切面面积比相反。nNOS-mRNA表达相对含量,NOS活性和NO含量结果与Fos阳性神经元切面面积比的变化一致。结果中有统计学意义为P<0.05。结论丙泊酚对抑郁大鼠的行为和学习记忆能力无明显影响;单纯ECT能改善抑郁大鼠的行为,但明显降低其学习记忆能力;丙泊酚复合ECT则对抑郁大鼠的行为和学习记忆能力均有较好的改善。其对学习记忆的改善可能与丙泊酚抑制ECT介导的海马组织Fos蛋白和nNOS-mRNA的过度表达,削弱NOS激活生成过多NO所致的中枢神经毒性反应有关。