丙泊酚对颅脑损伤大鼠脑水肿和水通道蛋白-4的影响.doc

丙泊酚对颅脑损伤大鼠脑水肿和水通道蛋白-4的影响目的脑水肿是过多的水分积聚在脑实质内造成大脑肿胀的疾病,是颅脑损伤最常见的继发损伤,是颅脑损伤患者致死致残的重要原因,其引发的颅内压增高、脑疝等加重神经功能损伤,是颅脑损伤后治疗的关键。水通道蛋白4(Aquaporin-4)是在脑高表达的一种水通道蛋白,主要表达于星形胶质细胞和室管膜细胞,尤其在与毛细血管和软脑膜直接接触的星形胶质细胞表达丰富,是控制水进出脑组织的通道。AQP4表达的失调与大脑功能障碍密切相关,包括脑水肿、脑积水、脑卒中、肿瘤、感染和癫痫等。因此控制水通道蛋白4的表达有可能为治疗脑水肿提供新思路。异丙酚是一种临床广泛应用的静脉麻醉药,可减少脑血流量、降低颅内压,具有神经保护作用,但是有关异丙酚对创伤性脑损伤后脑水肿和AQP4的影响研究还较少。因此本研究采用经典颅脑损伤模型来观察异丙酚对大鼠创伤性脑损伤后脑水肿和水通道蛋白4(AQP4)的影响,并探讨其作用的可能机制,为异丙酚的临床用药提供理论基础。方法健康雄性Sprague-Dawley大鼠96只,体质量230~280g,随机分为假手术组、生理盐水组、异丙酚组,各组又分为8h、24h、48h、72h四个时间段,每组8只大鼠。按Feeney自由落体撞击法建立大鼠创伤性脑损伤(TBI)模型。假手术组仅有手术操作,但不造成颅脑损伤,生理盐水组于术后给予腹腔注射生理盐水(5ml/kg),异丙酚组于术后给予腹腔注射异丙酚(50mg/kg)。用干/湿法于术后各时间段测定大鼠TBI后脑组织含水量,做脑组织切片行HE染色,观察脑组织、细胞的形态学变化。并采用免疫组织化学方法检测脑组织AQP-4蛋白的表达,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测脑组织AQP4mRNA表达及其变化。结果异丙酚组在伤后各时间点脑含水量较生理盐水组明显降低(P<0.05),且两组脑含水量均于伤后48h脑含水量达到高峰。HE染色显示异丙酚组较生理盐水组脑组织水肿减轻,固缩神经元数量及神经元缺失相对减少。免疫组化结果显示异丙酚组较生理盐水组能显著减少损伤区脑组织AQP4的表达。RT-PCR结果显示异丙酚组AQP4蛋白表达量较生理盐水组明显减少(P<0.05)。结论1.大鼠自由落体脑损伤模型制作成功,早期就出现脑水肿,于伤后48h达到高峰.2.临床麻醉剂量异丙酚可减轻创伤性脑水肿,其机制可能与异丙酚下调创伤脑组织周围AQP4蛋白的表达有关。