ABO血型正定型标准操作规程.doc

ABO血型正定型标准操作规程一.目得:规范AＢO血型正反定型得操作、二.适用范围:适用于ABO血型正反定型。三.支持性文件:全国临床检验操作规程第二版、四。原理:根据红细胞上有或无A抗原或／与B抗原,将血型分为Ａ型、B型、AB型及O型。可利用红细胞凝集试验,通过正反定型准确鉴定AＢO血型。所谓正定型,就是用已知抗A与抗B分型血清来测定红细胞上有无相应得A抗原或／与B抗原;五.仪器:离心机。六。试剂:1.抗A、抗B分型血清;定期进行效价滴定,以保分型血清质量性能符合要求。抗A:１∶128,抗B:１∶128、七、样本要求:１.红细胞可用针刺手指采血,并直接用生理盐水稀释制成5%红细胞悬液;也可静脉采血,用1∶9枸橼酸钠抗凝.。２。血清取静脉血将血液沿管壁慢慢注入干燥试管中,待自然凝固后用玻璃棒轻轻搅动血块,使之与试管壁分离。或置37℃水浴1小时,使血块收缩离心分离血清。八.操作步骤:1。取洁净小试管３支,分别标明抗A.抗B与抗A+Ｂ,用滴管分别加抗Ａ、抗B与抗Ａ+B分型血清各1滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞悬液１滴,混合。2.另取洁净小试管３支,分别标明Ａ、B与Ｏ细胞;用滴管分别加入受检者血清１滴于试管底部,再分别以滴管加入A、B与O型5％试剂红细胞悬液1滴,混合。3、用离心机以1000r/ｍin离心1分钟;或34０0r／10秒、４.将试管轻轻摇动,使沉于管底得红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(溶血)现象、如肉眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。５.观察结果时既要瞧有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A、B亚型;类B或ciｓAＢ得发现。6、凝集强度判断标准:4＋＝红细胞凝集成一大块,血清清晰透明3＋=红细胞凝集成数小块,血清尚清被鉴定血得血型抗Ａ(B型)抗B(A型)Ａ型+—B型-+Ｏ型—-AＢ型+＋九.注意事项1.观察结果时不可用力振摇;2.严格按规程操作,避免操作失误,以免重新试验浪费时间与试剂;3.试验结束后,试剂置2-６℃冰箱保存,以免试剂中得免疫球蛋白变质聚凝胺法交叉配血实验操作规程ﻫ1、目得:检出与鉴定意外抗体、ﻫ2、原理:凝聚胺溶解后产生得阳离子中与红细胞表面得唾液酸使红细胞间距缩短,发生由ＩgG直接搭桥得可逆得非特异性凝集,当非特异性凝集回复时,只剩下由抗原抗体搭桥得特异性凝集。ﻫ3。适用范围:配血。ﻫ4、所需材料:聚凝胺试剂、、洁净试管、滴管、离心机ﻫ5。操作程序:5、1以生理盐水洗涤受血者与献血者红细胞1-３次,配成3—5%得悬液。5.2交叉配血试验:主侧:2滴患者血清加１滴供者3-5％得ＲBＣ悬液、ﻫ次侧:2滴供者血清加1滴患者３－5%得RＢC悬液。。ﻫ５.３每只试管加4滴低离子液,混合放置1分。ﻫ5、4分别加2滴Polｙｂrenｅ应用液,混合放置15秒、ﻫ5.5离心34００转/分15秒,弃上清,控干、5。６观察管底有无聚凝物,如果没有则需重做、ﻫ5、７每管各加2滴解聚液,轻轻混合10秒,观察结果并做记录。５、8结果判定:１0秒内若为Poｌybreｎe引起得聚合应该会散开,判为阴性、若为抗原抗体引起得凝聚则不会散开,判为阳性、ﻫ6.注意事项:6、1可以用EDTＡ血浆代替血清ﻫ6、2加入解聚液后应该在３分钟之内观察结果6.3解聚液不可多加,以免降低试验灵敏度