一种采用多相、同轴液体离心提取天然产物活性成分的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115957535A(43)申请公布日2023.04.14(21)申请号202310123447.7(22)申请日2023.02.16(71)申请人中国药科大学地址210009江苏省南京市鼓楼区童家巷24号(72)发明人肖得力熊越陈朱辉鲁紫薇陈沛(74)专利代理机构南京经纬专利商标代理有限公司32200专利代理师唐循文(51)Int.Cl.B01D11/02(2006.01)B01D11/04(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图4页(54)发明名称一种采用多相、同轴液体离心提取天然产物活性成分的方法(57)摘要本发明属于植物提取分离相关技术领域，且特别涉及一种采用多相、同轴液体离心提取天然产物活性成分的方法。该方法包括天然产物预处理、多相提取溶剂的制备：制备一系列不同密度、不同亲/疏水性质的水性溶剂和有机溶剂；多相、同轴液体离心平台的构建；本发明实现了一种基于同轴液体离心机的多液相提取系统，提供了一种同时提取天然产物不同部位的方法，从而提高天然产物提取效率，促进医药行业的发展。CN115957535ACN115957535A权利要求书1/1页1.一种采用多相、同轴液体离心提取天然产物活性成分的方法，包括如下步骤：a、天然产物预处理：将天然产物烘干、研磨成粉末后过筛，然后用水性溶剂或者有机溶剂预处理，得到天然产物预处理浸膏，备用；b、多相提取溶剂的制备：制备一系列不同密度、不同亲/疏水性质的水性溶剂和有机溶剂，备用；c、多相、同轴液体离心平台的构建：将提取溶剂与样品溶液依照密度从大到小的顺序加入样品瓶，构成三液相或多液相体系，并将样品瓶径向固定在离心机上；其中所示的天然产物为侧柏叶。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤a中，天然产物粉末过筛目数为65～200目，天然产物粉末与水性溶剂或有机溶剂的料液比为1:1～1:50g/mL。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤b中，多相提取溶剂的种类包括有机溶剂和水性溶剂；其中有机溶剂包括石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、四氯乙烯、二氯甲烷、氯仿、聚乙二醇和二(2‑乙基己基)磷酸酯；水性溶剂包括柠檬酸钠和磷酸二氢钠溶液。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤c中，各相溶液体积比为1:1～1:10，离心机转速为200～20000rpm，离心提取时间为5～360min。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：a、天然产物预处理：侧柏叶粉末用75％乙醇浸泡过夜，料液比为1:10g/mL，微沸回流提取6h，重复三次，合并乙醇，旋蒸后得到乙醇浸膏，浸膏分散在2L水中，获得样品液，备用；b、多相提取溶剂的制备：制备一系列不同密度、不同亲/疏水性质的水性溶剂和有机溶剂，备用；c、多相、同轴液体离心平台的构建：将提取溶剂与样品溶液依照密度从大到小的顺序加入样品瓶，构成三液相体系，并将样品瓶径向固定在离心机上；具体条件为乙酸乙酯、样品溶液、正丁醇/二氯甲烷溶液体积比为2:1:2，其中正丁醇/二氯甲烷溶液为正丁醇与二氯甲烷按体积比1:1混合所得，转速为1000rpm，离心提取时间为30min。2CN115957535A说明书1/8页一种采用多相、同轴液体离心提取天然产物活性成分的方法技术领域[0001]本发明属于植物提取分离相关技术领域，且特别涉及一种采用多相、同轴液体离心提取天然产物活性成分的方法。技术背景[0002]天然产物是指动、植物提取物或微生物体内的组成成分或其代谢产物。其中主要为黄酮类、生物碱类、多糖类、挥发油类、醌类、萜类、皂苷类、酚酸类及氨基酸与酶等。天然产物早已在医药领域发挥不可忽视的作用：如从黄花蒿茎叶中提取得到的青蒿素是治疗疟疾耐药性效果最好的药物；从银杏叶中提取得到的银杏内酯B能抑制血小板活化因子；从侧柏叶中提取得到的雪松烯对艰难梭状芽胞杆菌和产气荚膜杆菌有明显的抑制作用。[0003]而天然产物种类繁多，只对一种天然产物进行提取或对不同天然产物进行分步提取必然造成原料和试剂的浪费。但目前工业与实验室对天然产物的提取分离方法主要还是通过液‑液两相萃取或者柱层析，它们的步骤繁琐，需要消耗大量的试剂和时间，且效率低下。此外，一些提取天然产物的新方法如超临界流体提取由于设备的昂贵，难以大范围推广；而微波、脉冲电场等提取方法也不适合工业上大规模的生产。现有利用离心机的提取技术中，存在离心萃取机与多级离心萃取系统的料仓与仪器零件不能分离、清洗较为困难等问题，不利于仪器的维护和其他天然产物的提取，且它们均是以液‑液两相萃取为基础。[0004]多相、同轴液体离心提取是一种利用多个提取液同时对原料进行提取的技术。多液相体系在离心时，会随转速增大而逐渐形成同一个轴心的多层空心液柱，此时两液体间的接触面