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脐带间充质干细胞的采集及储存脐带间充质干细胞的采集及储存脐带间充质干细胞的采集及储存张绪芹中图分类号:R714.56(淄博市妇幼保健院,山东255029)文章编号:1006-9534(2011)01-0055-02业人员逐一编号统一保存。讨论文献标识码:B脐带间充质干细胞是干细胞的一种。因能分化成间质组织而得名,具有亚全能分化潜能,在特定的体内外环境下,能够诱导分化成为多种组织细胞。从而给人类多种疾病的[1,3]。其临床应用前景非常好。我院自治疗提供了原材料2009年7月始开展此项业务,积累了一定的经验,先报道如下。1.脐带通常在胎儿、胎盘娩出后被废弃。而脐带中含有大量的间充质干细胞,通过保存脐带,可以变废为宝方法简单、易操作,对孕妇和胎儿无不良影响。[4]。且资料与方法1.一般资料2009年7月~2010年2月,在我院分娩并采集脐带留取间充质肝细胞的产妇60例,其中,剖宫产者46例,经阴分娩者14例。产妇年龄22~38岁,孕周37~42周,新生儿Apgar评分7~10分,体重2500~5600g,所有采集脐带的产妇和新生儿均无异常。采集的脐带放置在特制的保存液中,集中保存。2.方法(1)在产科门诊设立脐带间充质干细胞知识宣传栏,让前来做孕期检查的孕妇极其家属,了解脐带间充质干细胞的有关知识和保存脐带的好处。告知采集脐带是在胎儿、胎盘娩出后采集,不会对产妇和新生儿造成损害。(2)对有意保存脐带的孕产妇,由脐带保存机构的专业人员,向她们及其家属详细介绍脐带的采集方法和保存过程,讲解脐带间充质干细胞的特性及临床应用,回答他们的问题,解除其疑虑,告知保存脐带所需要的费用和年限。(3)签订协议。以双方自愿的原则,与脐带保存机构签订保存协议,明确双方的权利和责任。缴纳所需的费用。(4)准备用物。产妇入院后,要向值班医生和助产士说明要保存脐带,以便准备采集用物,详细询问并记录产妇及其丈夫的家族史、遗传病史、孕期检查情况。(5)产妇入院护理。按产妇住院护理常规。护士要帮助产妇进行血液、尿液检查,心电图检查、胎心监护、彩超、胎儿、胎盘功能检查等,做好产妇和家属的心里护理,消除他们的恐惧疑惑心里。(6)留取过程。手术室、产房内严格消毒,所用物品均为一次性无菌材料。胎儿娩出后,常规结扎处理好脐带,胎盘娩出后,先结扎脐带的断端,在距断端20~40cm处用0.5%碘伏棉球消毒后剪断,轻轻挤净脐血管内的血液,注意一定要把血液挤干净,再用无菌丝线结扎,然后将用生理盐水把脐带冲洗干净,最后把脐带放入盛有特制保存液的容器中密封.。在容器外贴上标签,注明产妇姓名、留取单位、住院号、新生儿出生时间、性别、体重。另采集产妇静脉血5ml于试管内。详细填写产妇和新生儿的有关信息和分娩情况表格。让产妇和家属确认并签字。将脐带、试管和信息表格,一起放入4℃的冰箱中。(7)通知脐带保存机构的专业技术人员来取。时间不能超过48h。结果此60例产妇均系自愿保留脐带提取间充质干细胞,并积极配合。所留取的脐带均符合保存条件,被脐带保存库专2.保留脐带间充质干细胞的适应症(1)产妇要求:年龄在38岁以下,发育、营养正常,无恶性肿瘤及传染病,无家族遗传病史,无血液病、代谢性疾病,羊水检查未发现染色体异常。(2)胎儿要求:活胎、无畸形。3.间充质干细胞的特性(1)具有强大的增殖能力和多向分化潜能,在适宜的体内或体外环境下,不仅可分化为造血细胞,还具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力。(2)具有免疫调节功能,通过细胞间的相互作用及产生细胞因子抑制T细胞的增值及其免疫反应,从而发挥免疫重建的功能。(3)具有来源方便,易于分离、培养、扩增和纯化,多次传代扩增后仍具有干细胞特性,不存在免疫排斥的特性。4.间充质干细胞临床应用的常见问题(1)免疫排斥反应,同种异体干细胞移植最大的限制就是免疫排斥反应,引起细胞间移植排斥的是一类称作主要组织相容性抗原的蛋白质分子。间充质干细胞最大的特性就是几乎不表达HLA-II类分子,这就意味着不同个体间应用间充质干细胞不会引起排斥反应,为间充质干细胞的广泛应用奠定了基础。(2)致瘤性,已有研究表明,人间充质干细胞在体外培养扩增25代以上仍可保持基因稳定,不会形成恶性克隆,同时动物体内实验也未见肿瘤形成,这就为间充质干细胞的临床应用提供了有力的保障。(3)质控体系为保证临床用间充质干细胞的质量,在分离、培养、传代、冻存及检测的每一个过程均设置了多重质控,且均在GMP实验室内完成,制备的间充质干细胞在所有检测完成并合格后投入临床应用。5.脐带间充质干细胞的.优点(1)脐带中的间充质干细胞更原始,有更强的增值分化能力。(2)免疫细胞较为幼稚,功能活性低,不会触发免疫反应及引起移植物抗宿主病。(3)干细胞易于分离,纯度高,无肿瘤细胞污染。