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本发明属于茄尼醇提取技术领域,具体涉及一种废次烟叶中提取茄尼醇的方法,包括如下步骤:(1)对废次烟叶进行水洗、干燥和粉碎;(2)用95%乙醇?醋酸乙酯混合液对预处理后的废次烟叶进行回流提取,过滤得滤液;重复提取两次,合并滤液,蒸馏得废次烟叶浸膏;(3)用氢氧化钾的乙醇溶液溶解废次烟叶浸膏,蒸馏回收乙醇,得皂化反应产物;(4)用石油醚对皂化反应产物进行萃取,萃取两次合并萃取液,冷析结晶,过滤得茄尼醇粗品;(5)通过硅胶柱对茄尼醇粗品进行层析分离,用石油醚?醋酸乙酯混合液进行洗脱,浓缩结晶得茄尼醇精品。本发明的提取方法简单易操作,生产效率高,提取出的茄尼醇纯度和收率高,生产成本低,适合工业化生产。