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本发明提供了一种含有六价铬还原微生物的铬污染修复试剂及其制备方法和应用。包括:在六价铬还原微生物菌液中加入可溶性盐,制备六价铬还原微生物菌剂,以强化六价铬的生物还原。将其原位注入或喷淋至铬污染土壤或地下水,实现六价铬原位快速修复。其中,所述可溶性盐包括亚铁、三价铁、镁离子等中的一种或几种。本发明采用来源广泛、价格低廉的可溶性盐,利用其电子供体或微生物的电子穿梭体作用,协同强化实现六价铬的生物还原,操作简单,成本低,反应高效,可实现铬污染土壤或地下水的原位快速修复。