一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116023326A(43)申请公布日2023.04.28(21)申请号202310028120.1C07D401/10(2006.01)(22)申请日2023.01.09C07D455/04(2006.01)C09K11/06(2006.01)(71)申请人大连理工大学C09B23/14(2006.01)地址116024辽宁省大连市甘井子区凌工路2号申请人深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司(72)发明人樊江莉夏天平陈庚文夏卓然叶燚彭孝军(74)专利代理机构大连至诚专利代理事务所(特殊普通合伙)21242专利代理师刘丽媛邓珂(51)Int.Cl.C07D213/38(2006.01)G01N21/64(2006.01)权利要求书2页说明书10页附图7页(54)发明名称一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针及其制备方法和应用。其中，一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针，所述氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针可以对DNA进行标记，引起位于近红外区的荧光光谱的变化，结构通式如下所示：本发明公开的一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针，所述荧光探针对DNA具有优异的选择性，较大的斯托克斯位移和良好的活细胞通透性与细胞核定位能力，并且具有良好的生物应用。CN116023326ACN116023326A权利要求书1/2页1.一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针，其特征在于，所述氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针可以对DNA进行标记，引起位于近红外区的荧光光谱的变化，结构通式如下所示：其中，R1选自取代或未取代苯基；R2选自C1‑8含氮烷基、取代或未取代含氮或含氧杂环；所述含氮或含氧杂环由取代或未取代苯基取代；X为卤素或PF6‑；R1和R2的苯基各自独立的选自以下的取代基任选取代：CN、COOH、NH2、NO2、OH、SH、C1‑6烷氧基、C1‑6烷基氨基、C1‑6酰胺基、卤素或C1‑6卤代烷基。2.根据权利要求1所述的一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针，其特征在于，所述R1选自氢、苯基或联苯基。3.根据权利要求1所述的一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针，其特征在于，所述R2选自N，N‑二甲基，哌嗪基或2，6‑二甲基哌嗪基。4.根据权利要求1所述的一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针，其特征在于，所述氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针为：5.权利要求1‑4任一所述的一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针的制备方法，其特征在于，制备流程如下所示，其步骤如下：1)将4‑甲基吡啶与1‑氯‑2，4‑二硝基苯按摩尔比1：(1‑2)在反应溶剂中反应，制备式Ⅰ的化合物；2)将式Ⅰ的化合物与氨基取代的芳香化合物按摩尔比1：(1‑5)在反应溶剂中反应，制备2CN116023326A权利要求书2/2页式Ⅱ的化合物；3)将式Ⅱ的化合物与对位取代的苯甲醛按摩尔比1：(1‑2)在反应溶剂和碱性催化剂中反应，反应结束后冷却到室温得到反应液，将反应液旋蒸浓缩、析出沉淀、柱层析硅胶进行分离提纯，得到目标化合物。6.根据权利要求5所述的一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针的制备方法，其特征在于，在步骤1)中，反应温度为70‑90℃，反应时间为6‑24h，反应溶剂为乙醇或甲醇。7.根据权利要求5所述的一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针的制备方法，其特征在于，在步骤3)中，反应温度为70‑90℃，反应时间为3‑8h，反应溶剂为乙醇或甲醇。8.根据权利要求5所述的一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针的制备方法，其特征在于，在步骤3)中，所用洗脱剂包括体积比为100：(10‑20)的二氯甲烷与甲醇混合液。9.权利要求1‑4任一所述的一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针的应用，其特征在于，该氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针在定量检测核酸和/或生物染色中的应用。3CN116023326A说明书1/10页一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及核酸定量检测及生物染色领域，尤其涉及一类氮芳基吡啶菁染料衍生物荧光探针及其制备方法和应用。背景技术[0002]核酸是脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的总称，是由许多核苷酸单体聚合成的生物大分子化合物，是储存和传递遗传信息的主要物质基础，也是生命的最基本物质之一。生物体正常细胞均具有比较稳定的DNA二倍体含量，只有当发生癌变或具有恶性潜能的癌前病变时，才会发生异常改变。因此对DNA的特异性识别和精确测量，尤其是在活细胞内进行检测，在癌症的早期诊断中意义非常重大。[0003]小分子有机染料能够通过与核酸的序列特异性相互作用显示荧光开启，在荧光光谱、诊断、成像和生物医学应用中发挥着不可或缺的作用。如今，小