巴戟天对大鼠骨髓基质细胞增殖、成骨分化及cbfal基因表达影响的研究开题报告大学毕设论文.doc

福建中医学院攻读博士学位研究生课题研究计划系（院、部）：骨伤系教研室：骨伤教研室专业：中医骨伤科学研究方向：骨折愈合导师姓名：王和鸣教授课题研究起止时间：2003年9月1日至2005年5月1日研究生签名：王力填表时间：2003年12月1日说明一、本计划由研究生本人在向导师小组作过开题报告后填写，一式二份，最后经系（院、部）批准后，一份留系（院、部）一份送研究生部存档。二、开题报告一般要求在第三学期进行，最迟不得超过第四学期。三、计划批准后非经同样手续不得随意更改。四、在课题执行过程中导师检查两次。检查情况及变动情况应记录在表内。研究课题名称：巴戟天对大鼠骨髓基质细胞增殖、成骨分化及Cbfal基因表达影响的研究研究课题的目的，课题的理论与实际意义，国内外研究情况介绍课题研究目的：通过巴戟天水提物、巴戟天醇提物的含药血清对体外培养的骨髓基质细胞增殖、诱导骨髓基质细胞向成骨分化及CbfalmRNA的表达的影响的研究，探讨巴戟天促进成骨的有效部位，从分子生物学水平研究巴戟天促进成骨作用的机制，同时建立中药血清药理学方法培养骨髓基质细胞的模型，阐明补肾强骨类中药疗效作用机制，为中药促进骨折愈合，治疗骨折迟缓愈合、不愈合以及中医药在骨组织修复工程中的应用等提供科学依据，也为新药开发、中医药现代化研究提供科学的理论依据。课题的理论、实际意义及国内外研究介绍：骨折延迟愈合、不愈合和骨缺损患者临床并不少见，且治疗起来非常棘手，均属于骨伤科疑难病症，从目前的临床和研究来看，骨组织工程和中医药是最有希望取得突破的方法。由于某种因素如外伤、感染、肿瘤等而使骨丧失一些骨质，形成较大的间隙，称为骨缺损。绝大多数骨缺损都难以愈合，最后形成骨不连。由于缺损间隙大，成骨细胞难以爬过间隙而不能发生正常的愈合过程，仅由纤维组织填充。而通过组织工程学方法来治疗骨缺损是目前研究的热点之一。它不仅可以免除自身骨移植的供区损伤，也可避免同种异体移植供体来源有限和不可避免的免疫排斥反应。骨折愈合是复杂的组织学，生物学，内分泌学及生物力学的动态过程。骨折的生物学过程及其伴随的组织学变化已得到公认。虽然学者们对此过程的分期不尽相同，但并无实质上的差异。综合各种分期方法,骨折愈合从组织学上可概括为血肿和炎症期、原始骨痂反应期、软骨形成期和骨形成改建期等4个阶段[1,2]。骨折修复过程包括以下三个方面[1]：(1)骨折部位骨祖细胞的募集；骨折后，骨折端内外膜成骨细胞出现增殖，但它们并不直接参与骨端的连接。骨折间隙内来自髓腔的多潜能细胞及来自邻近软组织的原始成纤维细胞的聚集和增殖，在适当刺激后即变成具有成骨能力的骨祖细胞，积极参与骨联接。因此骨折后的炎症反映，骨折端及其邻近软组织的良好血供，对骨折愈合是十分重要的。(2)调控诱骨：人们已能在骨折修复过程中的不同时期和不同部位检测到多种具有诱导成骨作用的生长因子。它们能促进细胞增殖，分化及基质合成，对骨折的启动，发育调控及塑形均起重要作用。骨折血肿内炎症细胞，巨噬细胞及血小板均可释放不同的生长因子；血管内皮细胞，成纤维细胞，成软骨细胞，成骨细胞，以及它们的基质均为各种生长因子的来源[3]。（3）骨传导：选用合适材料桥接于骨端。上述任何一个环节存在缺陷，有可能出现骨折的延迟愈合和不愈合.骨愈合的机理非常复杂，它不同于其他组织器官的愈合．主要在于参与骨愈合的细胞较其他组织器官多．不同愈合阶段有不同的细胞参与．同时细胞外多种蛋白在此过程中也起重要作用。近年来，分子生物学作为从分子水平阐明生命本质的新兴边缘学科．在骨科基础研究领域日益得到重视并受到广泛应用。种子细胞的选择一直是困扰骨组织工程进展的难题之一，虽然已有研究利用骨外膜成骨细胞[5]、松质骨来源的成骨细胞[5]、软骨细胞[6]作为种子细胞，但这些细胞已接近成熟，体外培养增殖力弱，而且取材不方便，供体局部损伤大，来源有限。可是来源于骨髓的BMSCs在体外培养、扩增并诱导后有很强的成骨能力，且容易分离，来源广泛，应用安全方便，所以其正作为骨组织工程中首选的种子细胞日益受到重视[7、8]。存在于骨髓中的含有骨髓基质细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs)在不同的诱导条件下，能向成骨细胞、成软骨细胞、成纤维细胞、脂肪细胞等中胚层组织细胞分化，所以近年来又将其称为“间充质干细胞”或“骨源性干细胞”[9]。Reddi等[10]研究证实：成骨细胞前体―――骨祖细胞有两种类型，一是定向骨祖细胞(DeterminedOsteogenicPrecursorCell,DOPC),其具有干细胞特性，不需要外源性诱导物就能自动分化成骨，它仅在骨髓中及骨表面发现，由BMSCs转化而成；二是诱导性骨祖细胞(InducibleOsteogenicPrecurso