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本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。其中,该转氨酶突变体是由SEQIDNO:1所示的氨基酸序列发生突变得到,突变至少包括:T291A;或者转氨酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点,且与发生突变的氨基酸序列具有80%以上同源性的氨基酸序列,优选具有85%的同源性,更优选具有90%的同源性。本发明的上述转氨酶突变体扩大了酶的底物谱、提高酶对大位阻底物的催化能力;同时增强其稳定性,可在高浓度溶剂和高温度条件下进行催化反应;另外,转氨酶突变体的立体选择性也得到了极大的提高,可以更加高效生产手性胺,降低了生产成本和后期处理难度,适合推广用于手性胺的工业生产。