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原花青素提取方法的研究进展原花青素提取方法的研究进展原花青素提取方法的研究进展原花青素提取方法的研究进展【摘要】原花青素是一种具有重要生理活性的多酚类化合物。本文综述了天然原花青素的提取方法,其中包括有机溶剂提取、微波提取、超声波提取、超临界CO2萃取以及酶法等,以期为开发利用原花青素提供依据。【关键词】原花青素;提取方法;研究进展原花青素(简称PC)是植物界中广泛存在的一大类多酚类化合物。植物化学家通常将从植物中分离得到的一切无色的、在无机酸存在和加热处理下能产生红色的花青素(Cyanidin)的一类多酚化合物统称为原花青素.许多研究表明,原花青素是清除自由基很强的抗氧化剂,其抗氧化、清除自由基的能力是VE的50倍、VC的20倍,它能防治80多种因自由基引起的疾病,包括心脏病、关节炎等,还具有改善人体微循环功能。目前,原花青素已广泛应用于食品、药品、化妆品等领域。全世界对原花青素的研究越来越深入,其中对原花青素提取方法的研究是一大重点。原花青素传统的提取方法是有机溶剂提取法,但这种方法存在着对有效成分损失大、周期长、工序多、提取率不高等缺点,因此近10年来,在植物有效成分的提取方面出现了许多新技术、新方法,如超临界CO2萃取技术、超声波提取技术、微波萃取技术以及酶解技术等。现将原花青素提取方法综述如下。1原花青素的分类及分布原花青素是一大类多酚化合物的总称,起初统称归于缩合鞣质或黄烷醇类。最简单的原花青素是儿茶素、表儿茶素或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体.此外,还有三聚体、四聚体等直至十聚体。按聚合度的大小,通常将二~四聚体称为低聚体(ProcyanidolicOligomers,简称OPC),将五聚体以上的称为高聚体(ProcyanidolicPolymers,简称PPC).OPC为水溶性物质(PPC水溶性较差)、极易吸收;OPC消除自由基的能力与分子结构、聚合度有关。二聚体中,因两个单体的构象或键合位置的不同,可有多种异构体,易分离鉴定的8种结构形式分别命名为B1~B8,其中,B1~B4是由C4~C8键合,B5~B8是由C4~C6键合。在各类原花青素中,二聚体分布最广,研究得最多,也是最重要的一类原花青素.三聚体中,也因组成的单体及其相连接碳原子位置的不同形成各种各样的结构并命名为C1、C2等,其中C1在自然界中分布最丰富。研究表明,原花青素主要分布于以下的植物中:葡萄、英国山楂、单子山楂、花生、银杏、日本的罗汉柏、北美的崖柏、土耳其的侧柏、花旗松、白烨树、野生刺葵、番荔枝、野草萄、日本莽草、扁桃、高粱、耳叶番泻、两谷椰子、可可豆、贯叶金丝桃、头状胡枝子、粘胶乳香树、海岸松、洋萎陵菜和大黄等。2提取方法2.1水提取法由于有机溶剂会带来环境污染和产品的有毒有机物残留,人们在大力发展对环境友好的绿色提取技术-——水提取法。Masquelier最早从松树皮中用沸水粗提、乙酸乙酯纯化得到原花青素.1998年Duncan和Gilmour发明一种从植物材料(树皮、树叶、葡萄籽、皮、大豆、绿茶)中提取原花青素的方法。将材料粉碎(≤15mm),常压、60~100℃或高压100~125℃条件下采用脱氧热水提取(1min~20h),过滤采用超滤或反渗透或两者连用,浓缩滤液,真空喷雾或冷冻干燥,此法主要是提取分子量≤5000D的水溶性原花青素,得率为0.5%~10.0%之间,通常为6.5%~9.6%(随取样部位的差异而定),分离得到原花青素B1、B3、B6和C2.获得的产物对AAPH引发的亚油酸的氧化有明显抑制作用,1μg/mL能达到70%~79%的抑制率。毒理学检测表明:对于按人体重剂量给药组和100倍人体质量的剂量给药组24h内无毒害和副作用产生,慢性毒理学(5个月)试验也无明显毒、副作用.1999年Karim等人发明了在加压条件下,采用脱氧去离子水提取植物材料中的原花青素。将提取液超滤后,采用疏水性微孔聚合物树脂作填料的柱色谱方法,选用极性洗脱液(乙醇+水)洗脱,将洗脱液采用反渗透方法除去乙醇,干燥得到原花青素。选水作为提取剂,浸提耗时长,温度高,容易造成原花青素的损失;同时水的极性较大,溶出杂质也较多,很少单独使用。2.2传统有机溶剂提取传统的有机溶剂提取法有回流、渗漉及恒温水浴等方法.甲醇、丙酮、乙醇和乙酸乙酯是提取葡萄籽原花青素常用的有机溶剂,它们对原花青素有很好的溶解性,它们的极性大小顺序为甲醇>乙醇>丙酮>乙酸乙酯。乙醇是常用的提取溶剂,价格低廉,来源丰富。乙酸乙酯提取出的原花青素成分生物活性较好,但是由于极性较小,对原花青素的提取并不完全。甲醇和丙酮水溶液(50%~75%)对原花青素都有较好的提取性能,同时也多用做原花青素含量测定时的提取溶剂。熊何健等人比较了甲醇、乙醇、丙酮水溶液对多酚的提取效果,结果表明:70%丙酮水溶液为