复方烟酸缓释片药动学研究样本.doc

复方烟酸缓释片Beagle犬体内药代动力学研究于华作者简介：于华（1978-），女（汉族），山东泰安人，研究生研究生，E-mailyuhua；孙立新（1967-），女（满族），辽宁新宾人，副专家，重要从事化学药和中药药代动力学研究，Tel.[phone]，E-mailslx。，孙艳2，孙峰3，王婷婷2，孙玉静2，孙立新1（1．沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳110016；2．沈阳华泰药物研究有限公司，辽宁沈阳110015；3．沈阳东陵药业股份有限公司，辽宁沈阳110161）摘要：目建立RP-HPLC法同步测定比格犬血浆中烟酸及其重要代谢物烟尿酸药物浓度，并将建立办法应用于复方烟酸缓释片Beagle犬体内烟酸药代动力学研究。办法血浆样品用甲醇沉淀蛋白，上清液氮气流吹干，残留物用流动相复溶后分析，以富马酸为内标。色谱柱为DiamonsilC18(4.6mm×200mm，5m)柱，流动相为甲醇-四丁基溴化铵（0.04mol·L-1）(30:70，v/v)，流速为1.0mL·min-1，柱温为20˚C，检测波长为262nm，6只Beagle犬随机交叉口服500mg复方烟酸缓释片和参比烟酸普通片后，用RP-HPLC法测定血浆中烟酸、烟尿酸药物浓度。成果烟酸在0.2～80.0g·mL-1浓度范畴内线性关系良好，高、中、低3种浓度QC样品日内、日间RSD均不大于8.0%，提取回收率在90.0％～97.8％之间；烟尿酸在0.1～5.0g·mL-1浓度范畴内线性关系良好，高、中、低3种浓度QC样品日内、日间RSD均不大于9.1%，提取回收率在95.9％～99.5％之间。Beagle犬单剂量口服复方烟酸缓释片500mg后，t1/2为（0.69±0.43）h，Tmax为（2.08±0.43）h，Cmax为（30.85±4.51）mg·L-1，AUC0-12为(59.97±21.46)mg·h·L-1，AUC0-∞为（68.57±24.40）mg·h·L-1。结论该办法敏捷、迅速、精确，操作简便，合用于血浆中烟酸浓度测定和药代动力学研究。单剂量口服复方烟酸缓释片后，测得Cmax和AUC与烟酸普通片均有明显性差别，受试缓释片Tmax长于参比普通片，Cmax低于参比普通片，阐明受试缓释片无突释现象，有一定缓释效果。核心词：烟酸；烟尿酸；缓释片；血药浓度；药代动力学烟酸（Nicotinicacid）又名尼克酸，为B族维生素之一，烟酸半衰期短，仅25～45min，重要代谢产物为烟尿酸。临床上小剂量用于防止和治疗烟酸缺少症。据文献报道[1]，大剂量时（每日3～6g）有降血脂作用。大剂量使用烟酸，皮肤潮红和瘙痒等不良反映也随之增长，制成复方缓释制剂可减轻血药浓度过高导致副反映，同步，烟酸缓释片降血脂作用可与一日一次给药洛伐她汀、辛伐她汀等药物相匹配。本研究参照文献[2-6]建立了同步测定Beagle犬血浆中烟酸及其重要代谢物烟尿酸血药浓度分析办法，为复方烟酸缓释片药代动力学研究提供实验根据。1仪器与材料1.1仪器高效液相色谱系统，涉及HP1100型输液泵及HP1100紫外-可见光检测器（美国安捷伦公司）；色谱柱为DiamonsilC18(4.6mm×200mm，5m)柱（北京迪马公司）；Rev.A.09.03化学工作站（美国安捷伦公司）；柱温箱为AT-130型（苏州市莱顿科学仪器有限公司）。1.2药物与试剂烟酸对照品（批号：100434-01，购自中华人民共和国药物生物制品检定所）；烟尿酸对照品（批号：0801，纯度99.6%，由沈阳华泰药物研究有限公司提供）；内标为富马酸（批号：1125，纯度≥99.5%，购自北京益利精细化学品有限公司）；复方烟酸缓释片（批号：040316，每片含烟酸500mg，由沈阳华泰药物研究有限公司提供）；甲醇（色谱纯，天津市康科德科技有限公司）；四丁基溴化铵（分析纯，天津市博迪化工有限公司）；比格犬空白血浆（沈阳药科大学动物中心惠赠）。2办法与成果2.1溶液配制2.1.1烟酸原则溶液配制精密称取烟酸25.0mg置25mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度（1000mg·L-1），将上述溶液用甲醇分别稀释成0.4，0.8，4.0，16.0，80.0，160.0mg·L-1烟酸原则系列溶液，置于4˚C冰箱内保存。2.1.2烟尿酸原则溶液配制精密称取烟酸25.0mg置25mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度（1000mg·L-1），将上述溶液用甲醇分别稀释成0.2，0.4，1.0，2.0，4.0，10.0mg·L-1烟酸原则系列溶液，置于4˚C冰箱内保存。2.1.3内标溶液配制精密称取烟酸25.0mg置25mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度（1000mg·L-1），将上述溶液用甲醇稀释至160.0mg·L-1，置于4˚C冰箱内保存。2.2色谱条