阿胶及驴胶补血颗粒中多种氨基酸含量测定方法的研究.doc

阿胶及驴胶补血颗粒中多种氨基酸含量测定方法的研究目的：通过异硫氰酸苯脂柱前衍生RPHPLC法建立阿胶中多种氨基酸的含量测定方法,并对十批以上药材进行指纹图谱相似度评价；建立驴胶补血颗粒中多种氨基酸的含量测定方法,并对十批以上制剂进行指纹图谱相似度评价。方法：将样品置于安瓿瓶中,加6mol/L盐酸水解并用0.1mol/L盐酸溶液定容后,用异硫氰酸苯脂衍生化,采用HPLC法测定。色谱柱为HypersilODS2C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm)；以乙腈-0.1mol/L醋酸钠溶液(3：97)为流动相A,以乙腈-水(4：1)为流动相B,梯度洗脱；检测波长为254nm；流速：1.0mL/min；柱温为30℃；进样量：5μL。定位样品中各峰,测定L-谷氨酸、L-羟脯氨酸、甘氨酸、L-丙氨酸、L-精氨酸、L-脯氨酸的含量,并采用国家药典委员会开发的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版,对10批以上药材或制剂的HPLC指纹图谱进行相似度评价,构建对照指纹图谱。结果：1.我们通过异硫氰酸苯脂柱前衍生RPHPLC法建立了阿胶及驴胶补血颗粒中氨基酸的含量测定方法,选择了6种主要的氨基酸进行含量测定能较好地反映阿胶中蛋白质及氨基酸的情况。阿胶中含有17种氨基酸,其中L-谷氨酸、L-羟脯氨酸、甘氨酸、L-丙氨酸、L-精氨酸、L-脯氨酸6种氨基酸平均含量之和阿胶为64.33%，驴胶补血颗粒为5.900%。2.分析得到阿胶、驴胶补血颗粒HPLC指纹图谱及各项技术参数,10批阿胶指纹图谱相似度都在0.998以上,17批驴胶补血颗粒指纹图谱相似度都在0.999以上。结论：本研究试验方法操作相对于用氨基酸分析仪检测简便、稳定、适用性广,精密度好,准确可靠。扩展了能同时测定的氨基酸的种类,建立了阿胶及驴胶补血颗粒中氨基酸的含量测定方法,可用于阿胶及驴胶补血颗粒的质量控制。